民族藥雪里見的薄層鑒別研究

民族藥雪里見的薄層鑒別研究

　    【摘要】  目的建立雪里見藥材的定性分析方法。方法采用薄層色譜法。結果方法快速，簡單可行，重復性好。結論可作為控制雪里見藥材質量的標準。

　    【關鍵詞】  雪里見; 薄層鑒別; β-谷甾醇

　    雪里見藥材為天南星科植物雪里見Arisacma rhizmatum C.E.C.Fiseh.的根莖。又名半截爛、躲雷草、避蛇參等，為恩施自治州常用的民族藥，主要用于風濕痹痛，肢體麻木，勞傷疼痛，跌打損傷，結核性潰瘍，瘡癰腫毒，毒蛇咬傷等，療效確切;臨床上治療風濕性關節炎作用尤為顯著。雖然雪里見的治療作用明顯，但長期以來，對雪里見的報道大多是資源調查和成分分析;定性分析方法除了顯微特征[1]外，還沒有薄層鑒別的報道。為了有效控制雪里見的質量，筆者對雪里見的薄層鑒別法進行了實驗研究。

　　據資料報道[2]，雪里見的主要成分為β-谷甾醇，因此筆者用β-谷甾醇作對照品，從提取方法、展開劑和顯色劑的選擇幾方面對雪里見的薄層色譜方法進行探研，擬定出鑒別方法。現報道如下。

　　1 材料與儀器

　　雪里見藥材樣品3批(批號080701，080925，080601);β-谷甾醇對照品(批號080208);硅膠G板(自制板和商品板);紫外線分析暗箱(型號YOKO-ZX)，超聲波清洗器(型號KQ-50B)，電熱恒溫干燥箱(型號GZX-DH);試劑：三氯甲烷、乙醇、硫酸、羧甲基纖維素鈉(均為分析純)。

　　2 方法與結果

　　2.1 提取溶劑的選擇雪里見主要成分為β-谷甾醇，可溶于三氯甲烷和乙醇等。因此筆者選用三氯甲烷為提取溶劑。采用超聲提取，過濾。方法簡單快捷。

　　2.2 顯色劑的選擇β-谷甾醇具有甾體結構，應與磷鉬酸，硫酸等發生顏色反應。筆者將雪里見藥材與對照品β-谷甾醇分別溶解、點樣、展開后，采用常用的10%的磷鉬酸試液噴后顯色和10%硫酸乙醇溶液噴后加熱顯色兩種方法對比。結果顯示，雪里見藥材與對照品β-谷甾醇在相同的位置上，均能顯出明顯的斑點。但用磷鉬酸顯色時，有拖尾現象。而用10%硫酸乙醇溶液噴后加熱顯色，不僅日光下能看見斑點，而且置紫外光燈(365 nm)下檢視，熒光斑點非常清晰，無干擾，較用磷鉬酸顯色更易判斷。因此筆者認為顯色劑采用10%的硫酸乙醇溶液為宜。

　　2.3 展開劑的選擇β-谷甾醇分子中含有羥基具極性。因此筆者分別用三氯甲烷-甲醇、三氯甲烷-乙醇、三氯甲烷-乙醚作展開劑進行試驗，結果顯示供試品與對照品在相同位置均能顯出相同顏色的斑點。但用三氯甲烷-乙醚作展開劑時，雜質斑點太多，易產生干擾。用三氯甲烷-甲醇或三氯甲烷-乙醇作展開劑，產生的雜質斑點較少，而采用三氯甲烷-甲醇作展開劑，展開后Rf值更適宜。所以筆者確定采用三氯甲烷-甲醇為展開劑　用三氯甲烷-甲醇為展開劑時，筆者分別采用(10∶3)、(10∶1)、(20∶1)、(40∶1)不同比例進行比較，經過多次試驗確認(40∶1)最合適。

　　2.4 薄層色譜方法在對提取溶劑、顯色劑、展開劑探研的基礎上，筆者擬定雪里見藥材薄層鑒別法如下。

　　2.4.1 供試品溶液的制備取本品粉末1 g，加三氯甲烷20 ml，超聲處理20 min，過濾，濾液蒸干，殘渣加三氯甲烷1 ml使溶解，即為供試品溶液。

　　2.4.2 對照品溶液的制備取β-谷甾醇對照品，用三氯甲烷制成每毫升含2 mg的溶液，作為對照品溶液。

　　2.4.3 薄層色譜方法[3]吸取上述供試品溶液10 μl，對照液2 μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板(自制板或商品板)上，以三氯甲烷-甲醇(40∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點;置紫外燈(365 nm)下檢視，顯相同顏色的熒光斑點(日光下色譜圖見TLC圖1-a，紫外光燈下色譜圖見TLC圖1-b)。a-日光下檢視 b-紫外光燈下檢視1.雪里見(來鳳產，批號080601) 1.雪里見(來鳳產，批號080601)2.雪里見(貴州產，批號080701) 2.雪里見(貴州產，批號080701)3.雪里見(貴州產，批號080925) 3.雪里見(貴州產，批號080925)4.β-谷甾醇對照品 4.β-谷甾醇對照品圖1 雪里見的TLC圖

　　3 結論

　　本實驗采用的薄層色譜法經過自制硅膠G板與商品硅膠G的比較，結果一致。

　　本鑒別方法采用超聲提取，方法快速，非常簡單。

　　筆者對多批雪里見藥材進行了相同方法的實驗，本文僅用3批樣品作代表，結果顯示，在相應位置上均顯相同顏色的斑點，重復性好，說明方法可行。

【參考文獻】

  　[1] 吳紹敏，楊紅艷.土家名藥半截爛資源調查及生藥學研究[J].中國民族民間醫藥雜志，2005，3:177.

　　[2] 周 杰，國興明，徐裕彬，等.貴州中藥雪里見化學成分分離和純化的初步研究[J].山地農業生物學報，2005，3：265.

　　[3] 國家藥典委員會.中國藥典，Ⅰ部[S].北京：化學工業出版社，2005：附錄31.

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