樹突狀細胞免疫學論文
當代，論文常用來指進行各個學術領域的研究和描述學術研究成果的文章，簡稱之為論文。它既是探討問題進行學術研究的一種手段，又是描述學術研究成果進行學術交流的一種工具。下面就是小編整理的樹突狀細胞免疫學論文，一起來看一下吧。
樹突狀細胞（DC）具有超強的抗原提呈能力，且能夠誘導初始 T 細胞活化，在免疫應答的誘導中具有重要作用[1].近年來，DC 疫苗在實驗室中廣泛應用于治療腫瘤的研究[2-3].探討 DC 2.4細胞疫苗在 MB 49 小鼠膀胱癌皮下移植瘤模型中的免疫學效應。
1 材料
�。�1）DC 2.4、MB 49 細胞，受贈于遼寧醫學院張佩教授。（2）C 57 BL/6 近交系雌性小鼠 36 只，8 ~ 12 周齡，體重 18 ~ 20 g,雌性，由上海斯萊克實驗動物有限公司提供，許可證編號：SCXK（滬）2012-0005.（3）FITC anti-Mouse CD 4、PE anti-Mouse CD69 購自美國 BD 公司。Anti-CD 4、Anti-CD 8、Goat Anti-RabbitIgG/HRP 購自北京博奧森生物技術有限公司。
2 方法
2.1 小鼠膀胱癌 MB 49 細胞皮下移植瘤模型的建立將 36 只小鼠按隨機數字表法分為 3 組，疫苗組、PBS 對照組和正常對照組。用 PBS 調整對數生長期 MB 49 細胞濃度至 5×106/ml,注射于各組小鼠右前腋皮下，每只 0.2 ml,建立 MB 49 細胞皮下移植瘤模型[4].
2.2 疫苗制備與接種凍融法制備 MB 49 粗提全抗原，按原細胞的比例 10:1 負載DC 2.4,制備 DC 2.4 疫苗。調整疫苗細胞濃度至 1×106/ml,各組小鼠分別于建模第 7 d、14 d 給予相應治療：疫苗組給予疫苗 0.1ml + PBS 0.1 ml,PBS 對照組給予 PBS 0.2 ml,注射于小鼠接種瘤細胞處皮下。正常組正常飼養。
2.3 疫苗免疫學效應檢測尼龍毛柱法分離各組小鼠脾 T 細胞，RPMI-1 640 調整細胞濃度至 1×107/ml.以 FITC-CD 4 和 PE-CD 69 雙標；流式細胞術檢測T 細胞 CD 4、CD 69 表達。取分離的 T 淋巴細胞，PBS 調整細胞濃度為 5×107/ml,24 孔板，37℃培養箱培養 48 h,取上清，ELISA法檢測 IFN-γ 含量。石蠟包埋瘤組織切片，Envision 兩步法免疫組化染色。免疫組化圖像分析系統分析，計數CD 4+和CD 8+細胞數。
2.4 統計學方法應用 SPSS13.0 軟件進行數據處理和統計學分析，計量資料采用t 檢驗，計數資料采用χ2檢驗，P<0.05,差異具有統計學意義。
3 實驗結果
3.1 流式細胞術檢測比較各組小鼠脾 CD 4+、CD 4+CD 69+T 細胞數流式檢測小鼠脾 CD 4+、CD 4+CD 69+T 細胞數，疫苗組均高于PBS 對照組和正常組，P < 0.01,差異具有統計學意義，（其中 1組P < 0.05），見表 1.各組取 1 張流式圖進行比較，見圖 1.
3.2 ELISA 法檢測比較各組小鼠脾 T 細胞培養上清 IFN-γ 水平脾 T 細胞培養上清 IFN-γ 水平，疫苗組高于 PBS 對照組和正常組，P < 0.01,差異具有統計學意義。見表 2.
3.3 免疫組化檢測比較各組小鼠瘤組織 CD 4+、CD 8+細胞數免疫組化檢測小鼠瘤組織 CD 4+、CD 8+細胞數，疫苗組 CD4+和 CD 8+T 細胞數均高于 PBS 對照組，P < 0.01,差異具有統計學意義。見表 3.
4 討論
CD 69 是一個早期淋巴細胞活化的標志，近年的研究表明[5],CD 69 抗原的表達在 T 細胞活化的過程中起重要作用。DC 2.4 疫苗刺激 T 細胞活化和增殖，使脾內 CD 4+、CD 4+CD 69+細胞數增加。DC 2.4 能通過分泌細胞因子和趨化因子趨化 T 細胞，通過血管內皮屏障而增加腫瘤部位的效應 T 細胞數量[6].CD 4+T 細胞在 IL-12 等細胞因子促進下可極化為 Th 1 細胞，Th 1 細胞產生IL-2、IFN-γ 等細胞因子，促進 Th 1 細胞、CTL 的增殖，從而放大免疫效應。CD 8+CTL 通過溶細胞作用直接殺傷腫瘤細胞和通過分泌 IFN-γ、TNF 間接殺傷腫瘤細胞。[圖略]
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