微柱凝膠在臨床輸血中的應用論文
摘 要:觀察微柱凝膠技術在檢測臨床配血標本中的作用,探討其在臨床輸血中的價值。方法:對血樣標本給予微柱凝膠法和凝聚胺交叉配血法,進行配血試驗;用微柱凝膠卡做抗體篩查,微柱凝膠法和試管法同時進行直接抗人球蛋白試驗,對比結果。結果:采用微柱凝膠技術進行交叉配血與凝聚胺交叉配血法,對不完全抗體的檢出率差異無統計學意義(P>0.05);交叉配血不合標本用兩種方法進行DAT試驗,陽性率差異無統計學意義(P>0.05);兩種方法進行DAT試驗,以試管法為金標準,微柱凝膠法敏感性為96.0%、特異性為90.2%,差異無統計學意義(P>0.05)。結論:微柱凝膠技術用于臨床血型血清學檢測中,具有靈敏度高、結果保存時間短、標本用量少、操作簡便等優點,具有臨床推廣價值。
關鍵詞:安全輸血;交叉配血;微柱凝膠技術;凝聚胺交叉配血法
臨床安全輸血中的首要保證是進行準確血型鑒定、交叉配血,同時這也是避免臨床發生溶血性輸血反應的重要環節[1]。微柱凝膠技術作為新的免疫學檢測技術,應用于直接抗人球蛋白試驗(DAT)中具有一定優勢,逐漸為人們所接受并廣泛應用于臨床血型血清學檢測。吉林省延邊大學附屬醫院對需要輸血的患者采用微柱凝膠法進行交叉配血與凝聚胺交叉配血法進行比較,同時將直接抗人球蛋白試驗的微柱凝膠法與試管法進行比較,現將結果報告如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料:選取本院2010年2月~2011年2月各科室需輸血的366例患者,用含有EDTA-K2抗凝劑的真空采血管采集患者血液5 ml,混勻并離心備用,取抗凝血標本進行試驗;供血血源來自無償獻血者。
1.2 儀器與試劑:微柱抗人球蛋白交叉配血卡、試管、微柱凝膠卡專用離心機、普通血清學專用離心機、微量加樣器、37℃免疫微柱孵育器,均為戴安娜公司產品;凝聚胺試劑為貝索公司提供;抗體篩選細胞為上海血液生物醫藥有限責任公司提供。
1.3 試驗方法:對血樣標本給予微柱凝膠法和凝聚胺交叉配血法,進行配血試驗;其中交叉不合的標本用兩種方法進行扶持,并采用微柱凝膠卡進行抗體篩查,以及進行直接抗人球蛋白試驗。
1.3.1交叉配血:按生產廠家所提供的說明書進行交叉配血,對366份標本采用微柱凝膠配血卡和凝聚胺試劑進行交叉配血。
1.3.2微柱凝膠卡抗體篩查試驗:按生產廠家所提供的說明書進行,上述366分標本中279份有妊娠史、輸血史、交叉配血不合者進行本次抗體篩查試驗。
1.3.3DAT試驗:交叉配血不合的12份標本進行DAT試驗(同時進行試管法和微柱凝膠法)。試管法具體操作按照傳統抗人球蛋白試管法操作。具體操作可按廠家所提供的.說明書進行。
1.4 統計學方法:采用2檢驗,以P<0.05為差異有統計學意義。
2 結果
2.1 交叉配血結果:366例交叉配血中:微柱凝膠法有4例主側交叉不合,7例次側不合;凝聚胺交叉配血法有3例主側出現凝聚,4例次側出現凝聚。兩種方法檢出不完全抗體的差異無統計學意義(P>0.05)。
2.2 抗體篩查結果:279份標本進行微柱凝膠卡抗體篩查試驗,結果有9例出現陽性。
2.3 直接抗人球蛋白試驗結果:12例交叉配血不合標本用兩種方法進行DAT試驗,陽性結果分別有6例(50.0%)、5例(41.7%),差異無統計學意義(P>0.05)。兩種方法檢測結果,以試管法為金標準,微柱凝膠法敏感性為96.0%、特異性為90.2%,差異無統計學意義(P>0.05)。
3 討論
微柱凝膠技術基本原理是微柱凝膠的微孔過濾功能,免疫化學抗體特異性反應可通過離心技術,把已經發生凝集反應的紅細胞阻滯于凝膠內,未發生凝集的單個紅細胞可穿過微孔而到達柱底,因此,微柱凝膠技術具有區分凝集的功能[2]。這種技術與傳統方法相比,具有以下優點:無須洗滌、操作簡便、試驗所需時間短;試驗結果清晰穩定、易于判讀結果、易于保存;試驗經歷的步驟經過標準化,其自動化程度較高,且靈敏度高、特異性強、重復性好,能夠減少標記以避免錯誤,試驗所需標本的量少[3]。
我國目前主要使用的交叉配血法有凝聚胺法以及抗球蛋白法,凝聚胺法原理是中和紅細胞表面電荷,通過離心使紅細胞非特異性凝集,改變液體環境使非特異性凝集解聚,而特異性凝集不能被解聚,可檢出不規則抗體。微柱凝膠法利用生物化學凝膠過濾技術、離心技術、免疫化學抗體抗原特異反應,可以靈敏檢測出標本中可能存在的血型抗體。微柱凝膠技術相比凝聚胺法,對實驗室操作人員技術要求不高,存在對結果產生影響的因素較少,結果判讀更為簡單,具有臨床推廣意義。
4 參考文獻
[1] Parkin DM,Brary FB,Pisani P.Global cancer statistics[J].Cancer J Clin,2005,55(1):74.
[2] 周益強,肖 倩.微柱凝膠技術在交叉配血中的應用研究[J].右江民族醫學院學報,2009,6(12):37.
[3] 陳燕萍,王長奇.微柱凝膠技術鑒定血型和篩檢不規則抗體的臨床應用[J].實驗與檢驗醫學,2008,6(3):26.
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