微柱凝膠在臨床輸血中的應(yīng)用論文
摘 要：觀察微柱凝膠技術(shù)在檢測臨床配血標(biāo)本中的作用，探討其在臨床輸血中的價(jià)值。方法：對(duì)血樣標(biāo)本給予微柱凝膠法和凝聚胺交叉配血法，進(jìn)行配血試驗(yàn)；用微柱凝膠卡做抗體篩查，微柱凝膠法和試管法同時(shí)進(jìn)行直接抗人球蛋白試驗(yàn)，對(duì)比結(jié)果。結(jié)果：采用微柱凝膠技術(shù)進(jìn)行交叉配血與凝聚胺交叉配血法，對(duì)不完全抗體的檢出率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；交叉配血不合標(biāo)本用兩種方法進(jìn)行DAT試驗(yàn)，陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；兩種方法進(jìn)行DAT試驗(yàn)，以試管法為金標(biāo)準(zhǔn)，微柱凝膠法敏感性為96.0%、特異性為90.2%，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論：微柱凝膠技術(shù)用于臨床血型血清學(xué)檢測中，具有靈敏度高、結(jié)果保存時(shí)間短、標(biāo)本用量少、操作簡便等優(yōu)點(diǎn)，具有臨床推廣價(jià)值。
關(guān)鍵詞：安全輸血；交叉配血；微柱凝膠技術(shù)；凝聚胺交叉配血法
臨床安全輸血中的首要保證是進(jìn)行準(zhǔn)確血型鑒定、交叉配血，同時(shí)這也是避免臨床發(fā)生溶血性輸血反應(yīng)的重要環(huán)節(jié)[1]。微柱凝膠技術(shù)作為新的免疫學(xué)檢測技術(shù)，應(yīng)用于直接抗人球蛋白試驗(yàn)（DAT）中具有一定優(yōu)勢，逐漸為人們所接受并廣泛應(yīng)用于臨床血型血清學(xué)檢測。吉林省延邊大學(xué)附屬醫(yī)院對(duì)需要輸血的患者采用微柱凝膠法進(jìn)行交叉配血與凝聚胺交叉配血法進(jìn)行比較，同時(shí)將直接抗人球蛋白試驗(yàn)的微柱凝膠法與試管法進(jìn)行比較，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料：選取本院2010年2月～2011年2月各科室需輸血的366例患者，用含有EDTA-K2抗凝劑的真空采血管采集患者血液5 ml，混勻并離心備用，取抗凝血標(biāo)本進(jìn)行試驗(yàn)；供血血源來自無償獻(xiàn)血者。
1.2 儀器與試劑：微柱抗人球蛋白交叉配血卡、試管、微柱凝膠卡專用離心機(jī)、普通血清學(xué)專用離心機(jī)、微量加樣器、37℃免疫微柱孵育器，均為戴安娜公司產(chǎn)品；凝聚胺試劑為貝索公司提供；抗體篩選細(xì)胞為上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供。
1.3 試驗(yàn)方法：對(duì)血樣標(biāo)本給予微柱凝膠法和凝聚胺交叉配血法，進(jìn)行配血試驗(yàn)；其中交叉不合的標(biāo)本用兩種方法進(jìn)行扶持，并采用微柱凝膠卡進(jìn)行抗體篩查，以及進(jìn)行直接抗人球蛋白試驗(yàn)。
1.3.1交叉配血：按生產(chǎn)廠家所提供的說明書進(jìn)行交叉配血，對(duì)366份標(biāo)本采用微柱凝膠配血卡和凝聚胺試劑進(jìn)行交叉配血。
1.3.2微柱凝膠卡抗體篩查試驗(yàn)：按生產(chǎn)廠家所提供的說明書進(jìn)行，上述366分標(biāo)本中279份有妊娠史、輸血史、交叉配血不合者進(jìn)行本次抗體篩查試驗(yàn)。
1.3.3DAT試驗(yàn)：交叉配血不合的12份標(biāo)本進(jìn)行DAT試驗(yàn)（同時(shí)進(jìn)行試管法和微柱凝膠法）。試管法具體操作按照傳統(tǒng)抗人球蛋白試管法操作。具體操作可按廠家所提供的.說明書進(jìn)行。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：采用2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
2.1 交叉配血結(jié)果：366例交叉配血中：微柱凝膠法有4例主側(cè)交叉不合，7例次側(cè)不合；凝聚胺交叉配血法有3例主側(cè)出現(xiàn)凝聚，4例次側(cè)出現(xiàn)凝聚。兩種方法檢出不完全抗體的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
2.2 抗體篩查結(jié)果：279份標(biāo)本進(jìn)行微柱凝膠卡抗體篩查試驗(yàn)，結(jié)果有9例出現(xiàn)陽性。
2.3 直接抗人球蛋白試驗(yàn)結(jié)果：12例交叉配血不合標(biāo)本用兩種方法進(jìn)行DAT試驗(yàn)，陽性結(jié)果分別有6例（50.0%）、5例（41.7%），差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。兩種方法檢測結(jié)果，以試管法為金標(biāo)準(zhǔn)，微柱凝膠法敏感性為96.0%、特異性為90.2%，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
3 討論
微柱凝膠技術(shù)基本原理是微柱凝膠的微孔過濾功能，免疫化學(xué)抗體特異性反應(yīng)可通過離心技術(shù)，把已經(jīng)發(fā)生凝集反應(yīng)的紅細(xì)胞阻滯于凝膠內(nèi)，未發(fā)生凝集的單個(gè)紅細(xì)胞可穿過微孔而到達(dá)柱底，因此，微柱凝膠技術(shù)具有區(qū)分凝集的功能[2]。這種技術(shù)與傳統(tǒng)方法相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)：無須洗滌、操作簡便、試驗(yàn)所需時(shí)間短；試驗(yàn)結(jié)果清晰穩(wěn)定、易于判讀結(jié)果、易于保存；試驗(yàn)經(jīng)歷的步驟經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)化，其自動(dòng)化程度較高，且靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好，能夠減少標(biāo)記以避免錯(cuò)誤，試驗(yàn)所需標(biāo)本的量少[3]。
我國目前主要使用的交叉配血法有凝聚胺法以及抗球蛋白法，凝聚胺法原理是中和紅細(xì)胞表面電荷，通過離心使紅細(xì)胞非特異性凝集，改變液體環(huán)境使非特異性凝集解聚，而特異性凝集不能被解聚，可檢出不規(guī)則抗體。微柱凝膠法利用生物化學(xué)凝膠過濾技術(shù)、離心技術(shù)、免疫化學(xué)抗體抗原特異反應(yīng)，可以靈敏檢測出標(biāo)本中可能存在的血型抗體。微柱凝膠技術(shù)相比凝聚胺法，對(duì)實(shí)驗(yàn)室操作人員技術(shù)要求不高，存在對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響的因素較少，結(jié)果判讀更為簡單，具有臨床推廣意義。
4 參考文獻(xiàn)
[1] Parkin DM,Brary FB,Pisani P.Global cancer statistics[J].Cancer J Clin,2005,55(1):74.
[2] 周益強(qiáng),肖 倩.微柱凝膠技術(shù)在交叉配血中的應(yīng)用研究[J].右江民族醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2009,6(12):37.
[3] 陳燕萍,王長奇.微柱凝膠技術(shù)鑒定血型和篩檢不規(guī)則抗體的臨床應(yīng)用[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2008,6(3):26.
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