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八味沉香散水提液對急性心肌缺血大鼠心電圖及血清酶的影響
【摘要】 目的觀察八味沉香散水提液對急性心肌缺血大鼠心電圖及血清酶的影響。方法采用大鼠舌下靜脈注射垂體后葉素復制急性心肌缺血模型 ,觀察八味沉香散水提液對大鼠注射垂體后葉素后不同時間點心電圖Ⅱ導聯 T波、J點變化情況及其對血清乳酸脫氫酶（LDH）和肌酸激酶 （CK）活性的影響。結果八味沉香散水提液能明顯改善垂體后葉素引起的心電圖J點位移和T波變化 ,降低大鼠血清 CK和LDH水平。結論八味沉香散水提液對垂體后葉素所致大鼠急性心肌缺血具有一定的保護作用。
【關鍵詞】 八味沉香散；心肌缺血；垂體后葉素
缺血性心臟病是心血管內科最常見的疾病，在我國隨著人民生活水平的提高，冠心病的發病率呈逐年增高趨勢，成為死亡的重要原因之一。傳統治療缺血性心臟病的民族藥逐漸得到人們的重視。八味沉香散是由沉香、肉豆蔻、廣酸棗、白蕓香、木棉花等8味藏藥組成，具有消心熱、寧心安神、醒腦開竅之功效，是藏醫臨床治療各種急慢性心腦血管系統疾病常用的藥物［1］。本實驗通過舌下靜脈注射垂體后葉素誘發大鼠急性心肌缺血模型來觀察八味沉香散對心肌缺血模型大鼠心電圖和血清酶的影響，探討八味沉香散抗心肌缺血損傷作用，為臨床用藥提供實驗依據。
1 材料與儀器
1.1 藥物八味沉香散水提液，稱取沉香100 g，肉豆蔻100 g，廣棗100 g，訶子100 g，白蕓香50 g，木香175 g，木棉花75 g，天竺黃50 g（均購于青海金訶藏藥藥業股份有限公司）敲碎混和，加水回流提取3次，合并3次濾液，濃縮到40%濃度的八味沉香散水提液備用；復方丹參片（陜西天洋制藥有限責任公司，0.25g/片，批號：Z20063272）。
1.2 動物SD大鼠，體質量200～260 g，♀♂各半，由青海省實驗動物中心提供，合格證號：青醫動管001號。
1.3 試劑垂體后葉素（蚌埠市宏業生化制藥廠，1ml：6U，批號:070503）。
1.4 儀器Biopac Mp150多導生理記錄儀(Biopac System.Inc)；750型全自動生化分析儀(日本東芝)。
2 方法
2.1 動物分組大鼠50只，隨機分為5組，每組10只，分別為正常對照組，模型對照組，陽性對照組（復方丹參片組），八味沉香散水提液大、小劑量組。八味沉香散水提液大、小劑量組大鼠灌胃1.0 g·kg-1和0.5 g·kg-1的八味沉香散水提液；陽性對照組大鼠灌胃復方丹參片0.03 g·kg-1；正常對照組和模型對照組大鼠灌胃同體積生理鹽水，各組均每天給藥1次，連續10 d。
2.2 心肌缺血損傷模型的制備采用大鼠舌下靜脈注射 0.8 U·kg-1的垂體后葉素復制大鼠急性心肌缺血模型。除正常對照組外，其余各組均于第10天灌胃給藥后24 h舌下靜脈注射垂體后葉素0.8 U·kg-1。
2.3 大鼠心電圖測定全部動物于末次灌胃給藥后24 h，用烏拉坦1.0 g·kg-1腹腔注射麻醉。仰臥固定于手術臺上，將針狀電極插入四肢皮下，連接Biopac Mp150多導生理記錄儀，穩定5 min后記錄正常Ⅱ導聯心電圖。大鼠舌下靜脈注射垂體后葉素0.8 U·kg-1，并于 5 s內注射完畢。記錄注射垂體后葉素后5 s，15 s ，30 s，1 min ，3 min ，5 min Ⅱ導聯心電圖，觀察 ST段和T波的變化情況。
由于大鼠 ST段不明顯 ,本實驗對心肌缺血程度的觀察指標主要定為 J點位移和T波的變化。J點位移和 T波高度測量以 P-R段為基線 ,每時間點測5個連續波形 ,取其平均值。記錄并計算 J點位移和T波的變化值（△J=注射垂體后葉素后各時間點J點值-注射前J點值；△T=注射垂體后葉素后各時間點T波值-注射前T波值），無論升高或降低,取變化的絕對值。
2.4 血清乳酸脫氫酶（LDH）和肌酸激酶（CK）活性測定注射垂體后葉素后45 min，心臟取血約1 ml，3 000 r/min，離心15 min制備血清，送青海省二醫院檢驗科測定血清乳酸脫氫酶（LDH）和肌酸激酶（CK）活性。
2.5 統計學處理
采用SPSS12.0 for windows軟件完成，計量資料組間比較，用方差分析和LSD-t檢驗，實驗結果用±s表示，P<0.05認為有統計學意義。
3 結果
3.1 八味沉香散水提液對垂體后葉素引起的心肌缺血大鼠心電圖ST段的影響各組大鼠注射垂體后葉素后，均出現J點位移，15 s后逐漸恢復，5 min時仍未恢復到注射垂體后葉素前的水平。模型對照組各時間點J點的變化值明顯高于正常對照組；復方丹參片組、八味沉香散水提液大、小劑量組各時間點J點的變化值則明顯低于模型對照組。結果見表1。表1 八味沉香散水提液對垂體后葉素引起的心肌缺血大鼠心電圖ST段影響（略）
3.2 八味沉香散水提液對垂體后葉素引起的心肌缺血大鼠心電圖T波影響模型對照組大鼠各時間點T波的變化值明顯高于正常對照組。復方丹參片組、八味沉香散水提液大、小劑量組各時間點T波的變化值則明顯低于模型對照組。結果見表2。表2 八味沉香散水提液對垂體后葉素引起的心肌缺血大鼠心電圖T波影響（略）
3.3 八味沉香散水提液對垂體后葉素引起的心肌缺血大鼠血清CK和LDH影響模型對照組大鼠血清LDH和CK活性明顯高于正常對照組，復方丹參片組，八味沉香散水提液大、小劑量組LDH和CK活性均明顯低于模型對照組。結果詳見表3。表3 八味沉香散水提液對垂體后葉素引起的心肌缺血大鼠血清CK和LDH影響（略）
4 討論
本研究采用了大劑量舌下靜脈注射垂體后葉素引起大鼠的心肌缺血性損傷模型，觀察了八味沉香散水提液對實驗性心肌缺血損傷的保護作用。垂體后葉素是從動物垂體中提取的, 內含加壓素能明顯收縮冠狀動脈、毛細血管、小動脈、小靜脈等［2］。給大鼠舌下靜脈注射垂體后葉素后，使冠狀動脈收縮，造成心肌供血不足，并能收縮全身小血管，導致心臟負荷加重，在心電圖上可見一系列心肌缺血的改變，表現為ST段改變、T波升高、心律失常等。利用垂體后葉素復制心肌缺血模型方法簡單，快捷有效。是評價心肌保護藥常用的心肌缺血損傷模型之一［3，4］。
心肌缺血缺氧時，引起高能磷酸化合物耗竭，使依賴能量的離子泵功能受損，導致線粒體鈣超載，并通過不同的信號傳導途徑產生大量毒性氧自由基，破壞線粒體膜和心肌細胞膜的完整性。心肌細胞膜的通透性增加，導致細胞內酶CK與LDH大量釋放。因此血液中心肌酶LDH，CK的活性可反映心肌缺血損傷的程度［5，6］。
本實驗結果發現, 模型對照組大鼠心電圖J點位移、T波變化、血清中LDH和 CK活性明顯高于正常對照組，說明舌下靜脈注射垂體后葉素0.8 U·kg-1制備的大鼠急性心肌缺血模型成功。復方丹參片及八味沉香散水提液能明顯改善垂體后葉素致急性心肌缺血大鼠心電圖T波和ST段變化，降低垂體后葉素致急性心肌缺血大鼠血清酶LDH和CK活性的升高，提示八味沉香散水提液對垂體后葉素所致大鼠急性心肌缺血具有一定的保護作用,為臨床用藥提供了理論依據。
【參考文獻】
［1］青海省衛生廳.青海藏藥標準［S］.1992：118.
［2］周 瓊，陸大祥，付詠梅，等. 甘氨酸對小鼠心肌缺血損傷的防治作用研究［J］. 中國藥理生理雜志，2002， 18 (4) : 12.
［3］徐叔云. 藥理實驗方法學，第3版 ［M］. 北京:人民衛生出版社，2003: 1009.
［4］Vincelette J, Pagila R, Kawai K, et al.Inhibition of Rho-Kinase by Hydroxyfasudil Prevents Vasopressin-Induced Myocardial Ischemia in Donryu Rats by Attenuating Coronary Vasoconstriction ［J］. Pharmacology,2005,75:145.
［5］高潤霖. 急性心肌梗死診斷和治療指南［J］. 中華心血管病雜志，2001，29 (12) :710.
［6］黃海霞，莫曉燕.中藥對心肌細胞的保護作用［J］.中草藥，2003，34（12）：1150.
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