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八味沉香散水提液對(duì)急性心肌缺血大鼠心電圖及血清酶的影響
【摘要】 目的觀察八味沉香散水提液對(duì)急性心肌缺血大鼠心電圖及血清酶的影響。方法采用大鼠舌下靜脈注射垂體后葉素復(fù)制急性心肌缺血模型 ,觀察八味沉香散水提液對(duì)大鼠注射垂體后葉素后不同時(shí)間點(diǎn)心電圖Ⅱ?qū)?lián) T波、J點(diǎn)變化情況及其對(duì)血清乳酸脫氫酶（LDH）和肌酸激酶 （CK）活性的影響。結(jié)果八味沉香散水提液能明顯改善垂體后葉素引起的心電圖J點(diǎn)位移和T波變化 ,降低大鼠血清 CK和LDH水平。結(jié)論八味沉香散水提液對(duì)垂體后葉素所致大鼠急性心肌缺血具有一定的保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】 八味沉香散；心肌缺血；垂體后葉素
缺血性心臟病是心血管內(nèi)科最常見的疾病，在我國(guó)隨著人民生活水平的提高，冠心病的發(fā)病率呈逐年增高趨勢(shì)，成為死亡的重要原因之一。傳統(tǒng)治療缺血性心臟病的民族藥逐漸得到人們的重視。八味沉香散是由沉香、肉豆蔻、廣酸棗、白蕓香、木棉花等8味藏藥組成，具有消心熱、寧心安神、醒腦開竅之功效，是藏醫(yī)臨床治療各種急慢性心腦血管系統(tǒng)疾病常用的藥物［1］。本實(shí)驗(yàn)通過舌下靜脈注射垂體后葉素誘發(fā)大鼠急性心肌缺血模型來觀察八味沉香散對(duì)心肌缺血模型大鼠心電圖和血清酶的影響，探討八味沉香散抗心肌缺血損傷作用，為臨床用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
1 材料與儀器
1.1 藥物八味沉香散水提液，稱取沉香100 g，肉豆蔻100 g，廣棗100 g，訶子100 g，白蕓香50 g，木香175 g，木棉花75 g，天竺黃50 g（均購(gòu)于青海金訶藏藥藥業(yè)股份有限公司）敲碎混和，加水回流提取3次，合并3次濾液，濃縮到40%濃度的八味沉香散水提液備用；復(fù)方丹參片（陜西天洋制藥有限責(zé)任公司，0.25g/片，批號(hào)：Z20063272）。
1.2 動(dòng)物SD大鼠，體質(zhì)量200～260 g，♀♂各半，由青海省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：青醫(yī)動(dòng)管001號(hào)。
1.3 試劑垂體后葉素（蚌埠市宏業(yè)生化制藥廠，1ml：6U，批號(hào):070503）。
1.4 儀器Biopac Mp150多導(dǎo)生理記錄儀(Biopac System.Inc)；750型全自動(dòng)生化分析儀(日本東芝)。
2 方法
2.1 動(dòng)物分組大鼠50只，隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為正常對(duì)照組，模型對(duì)照組，陽性對(duì)照組（復(fù)方丹參片組），八味沉香散水提液大、小劑量組。八味沉香散水提液大、小劑量組大鼠灌胃1.0 g·kg-1和0.5 g·kg-1的八味沉香散水提液；陽性對(duì)照組大鼠灌胃復(fù)方丹參片0.03 g·kg-1；正常對(duì)照組和模型對(duì)照組大鼠灌胃同體積生理鹽水，各組均每天給藥1次，連續(xù)10 d。
2.2 心肌缺血損傷模型的制備采用大鼠舌下靜脈注射 0.8 U·kg-1的垂體后葉素復(fù)制大鼠急性心肌缺血模型。除正常對(duì)照組外，其余各組均于第10天灌胃給藥后24 h舌下靜脈注射垂體后葉素0.8 U·kg-1。
2.3 大鼠心電圖測(cè)定全部動(dòng)物于末次灌胃給藥后24 h，用烏拉坦1.0 g·kg-1腹腔注射麻醉。仰臥固定于手術(shù)臺(tái)上，將針狀電極插入四肢皮下，連接Biopac Mp150多導(dǎo)生理記錄儀，穩(wěn)定5 min后記錄正常Ⅱ?qū)?lián)心電圖。大鼠舌下靜脈注射垂體后葉素0.8 U·kg-1，并于 5 s內(nèi)注射完畢。記錄注射垂體后葉素后5 s，15 s ，30 s，1 min ，3 min ，5 min Ⅱ?qū)?lián)心電圖，觀察 ST段和T波的變化情況。
由于大鼠 ST段不明顯 ,本實(shí)驗(yàn)對(duì)心肌缺血程度的觀察指標(biāo)主要定為 J點(diǎn)位移和T波的變化。J點(diǎn)位移和 T波高度測(cè)量以 P-R段為基線 ,每時(shí)間點(diǎn)測(cè)5個(gè)連續(xù)波形 ,取其平均值。記錄并計(jì)算 J點(diǎn)位移和T波的變化值（△J=注射垂體后葉素后各時(shí)間點(diǎn)J點(diǎn)值-注射前J點(diǎn)值；△T=注射垂體后葉素后各時(shí)間點(diǎn)T波值-注射前T波值），無論升高或降低,取變化的絕對(duì)值。
2.4 血清乳酸脫氫酶（LDH）和肌酸激酶（CK）活性測(cè)定注射垂體后葉素后45 min，心臟取血約1 ml，3 000 r/min，離心15 min制備血清，送青海省二醫(yī)院檢驗(yàn)科測(cè)定血清乳酸脫氫酶（LDH）和肌酸激酶（CK）活性。
2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
采用SPSS12.0 for windows軟件完成，計(jì)量資料組間比較，用方差分析和LSD-t檢驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果用±s表示，P<0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
3 結(jié)果
3.1 八味沉香散水提液對(duì)垂體后葉素引起的心肌缺血大鼠心電圖ST段的影響各組大鼠注射垂體后葉素后，均出現(xiàn)J點(diǎn)位移，15 s后逐漸恢復(fù)，5 min時(shí)仍未恢復(fù)到注射垂體后葉素前的水平。模型對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)J點(diǎn)的變化值明顯高于正常對(duì)照組；復(fù)方丹參片組、八味沉香散水提液大、小劑量組各時(shí)間點(diǎn)J點(diǎn)的變化值則明顯低于模型對(duì)照組。結(jié)果見表1。表1 八味沉香散水提液對(duì)垂體后葉素引起的心肌缺血大鼠心電圖ST段影響（略）
3.2 八味沉香散水提液對(duì)垂體后葉素引起的心肌缺血大鼠心電圖T波影響模型對(duì)照組大鼠各時(shí)間點(diǎn)T波的變化值明顯高于正常對(duì)照組。復(fù)方丹參片組、八味沉香散水提液大、小劑量組各時(shí)間點(diǎn)T波的變化值則明顯低于模型對(duì)照組。結(jié)果見表2。表2 八味沉香散水提液對(duì)垂體后葉素引起的心肌缺血大鼠心電圖T波影響（略）
3.3 八味沉香散水提液對(duì)垂體后葉素引起的心肌缺血大鼠血清CK和LDH影響模型對(duì)照組大鼠血清LDH和CK活性明顯高于正常對(duì)照組，復(fù)方丹參片組，八味沉香散水提液大、小劑量組LDH和CK活性均明顯低于模型對(duì)照組。結(jié)果詳見表3。表3 八味沉香散水提液對(duì)垂體后葉素引起的心肌缺血大鼠血清CK和LDH影響（略）
4 討論
本研究采用了大劑量舌下靜脈注射垂體后葉素引起大鼠的心肌缺血性損傷模型，觀察了八味沉香散水提液對(duì)實(shí)驗(yàn)性心肌缺血損傷的保護(hù)作用。垂體后葉素是從動(dòng)物垂體中提取的, 內(nèi)含加壓素能明顯收縮冠狀動(dòng)脈、毛細(xì)血管、小動(dòng)脈、小靜脈等［2］。給大鼠舌下靜脈注射垂體后葉素后，使冠狀動(dòng)脈收縮，造成心肌供血不足，并能收縮全身小血管，導(dǎo)致心臟負(fù)荷加重，在心電圖上可見一系列心肌缺血的改變，表現(xiàn)為ST段改變、T波升高、心律失常等。利用垂體后葉素復(fù)制心肌缺血模型方法簡(jiǎn)單，快捷有效。是評(píng)價(jià)心肌保護(hù)藥常用的心肌缺血損傷模型之一［3，4］。
心肌缺血缺氧時(shí)，引起高能磷酸化合物耗竭，使依賴能量的離子泵功能受損，導(dǎo)致線粒體鈣超載，并通過不同的信號(hào)傳導(dǎo)途徑產(chǎn)生大量毒性氧自由基，破壞線粒體膜和心肌細(xì)胞膜的完整性。心肌細(xì)胞膜的通透性增加，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)酶CK與LDH大量釋放。因此血液中心肌酶LDH，CK的活性可反映心肌缺血損傷的程度［5，6］。
本實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn), 模型對(duì)照組大鼠心電圖J點(diǎn)位移、T波變化、血清中LDH和 CK活性明顯高于正常對(duì)照組，說明舌下靜脈注射垂體后葉素0.8 U·kg-1制備的大鼠急性心肌缺血模型成功。復(fù)方丹參片及八味沉香散水提液能明顯改善垂體后葉素致急性心肌缺血大鼠心電圖T波和ST段變化，降低垂體后葉素致急性心肌缺血大鼠血清酶LDH和CK活性的升高，提示八味沉香散水提液對(duì)垂體后葉素所致大鼠急性心肌缺血具有一定的保護(hù)作用,為臨床用藥提供了理論依據(jù)。
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