影響生化檢測的常見因素分析

影響生化檢測的常見因素分析

　　除疾病之外，還有許多因素也可影響生化檢測的結果。這些因素可能在分析過程的前中后。下面是yjbys小編為大家帶來的關于影響生化檢測的常見因素分析的知識，歡迎閱讀。

　　分析前因素

　　分析前因素與病患本身，樣本收集，樣本處理等因素相關，這些因素通常會影響到分析前體液樣本的組成。包括以下幾個方面：

　　生物因素：病患與生具來的且可被控制的因素。

　　非生物學因素：包括樣本收集，處理，儲存，抗凝劑的使用。

　　分析中因素

　　分析中因素是能夠影響分析程序的因素。

　　干擾因素：脂血癥，溶血，黃疸，高蛋白血癥，藥物。以及其他更多情況。

　　質量控制：確保測試操作和結果的準確性。

　　分析后因素涉及到實驗室數據呈現、存儲和傳遞給臨床醫生的不同方式。

　　只要有可能，盡量控制以上三類因素，減少對實驗結果的影響。

　　1、分析前因素

　　在實驗室分析樣品之前，分析前因素影響樣品的組成(因此也將影響樣品質量)。

　　這些因素是實驗室分析中最重要和最常見的誤差來源，卻常在分析實驗數據時被忽略。

　　應該盡量控制這些因素，減少對實驗結果的影響。控制分析前因素包括獸醫或技師進行樣本的充分采集，準備和處理。當然也存在一些不能被控制的因素，例如評估疾病引起的結果時，必須考慮并識別物種的遺傳性生理差異。

　　分析前因素包括生物性和非生物性因素。

　　1.1 生物性因素

　　某些因素是動物固有的，例如品種，年齡，和性別。但在評估檢測結果時需考慮。記住，實驗室提供的絕大多數的參考值適用于健康的成年動物。獸醫可以控制其他生理性因素，例如當準備血液樣本時，確保動物已禁食12小時。

　　1.1.1 固有的生物性因素

　　物種：物種特異性導致分析來源和分析結果都存在顯著差異。例如丙氨酸氨基轉移酶是小動物而不是大動物的肝特異性酶。因此，必須將動物的生化結果與相同物種的參考區間進行比較，例如，不能使用馬的參考區間來分析驢的生化結果。

　　品種：生化分析中存在與品種相關的差異，但這些差異通常較小。健康馱馬比純種良馬通常肌酸激酶值更高。

　　年齡：許多生化分析成分隨年齡而變化，幼畜生化結果經常有變化，但不是因為疾病，而是與年齡有關，比如所有動物幼畜的堿性磷酸酶都偏高。一般來說，由臨床病理學實驗室提供的大多數參考范圍多通過成年動物確定，不太適用于幼齡動物。

　　性別：雌性動物懷孕或哺乳相關的生理狀態，可在非疾病狀態下影響分析結果。在一些物種中，可能存在不同性別的單獨參考區間，例如，人體內的血清鐵。一般來說，家畜幾乎沒有與性別相關的檢測偏差。

　　1.1.2 可控的生物性因素

　　樣本采集技術的標準化可以使這些因素對生化檢測結果的影響最小化。如果這些因素是不可避免的或被需要的(例如，在運動后采集樣品以檢測馬中的橫紋肌溶解癥)，結果分析期間必須考慮這些因素。

　　近期食物攝入：這將導致餐后脂血。脂血可能影響某些血漿成分的測量分析方法，從而導致結果無效�？梢酝ㄟ^禁食12小時收集適當的樣品來避免餐后脂血。事實上，禁食后脂血升高是繼發于疾病的脂質異常代謝的有利證據。

　　最近的進食可能影響與脂血癥無關的某些血漿成分濃度，例如葡萄糖。這種效應因為食物代謝的差異(例如非反芻與反芻動物相比)存在明顯的物種依賴性。

　　應激：應激(繼發于動物處理或潛在疾病)將對實驗室結果產生較大影響。應對幼齡或未馴化動物的應激尤為重要，在采集血液樣本時應可能降低動物應激。

　　運動：運動對于血漿成分的影響取決于運動的類型和強度。一般而言，應該在動物運動之前進行血液樣本的采集。

　　藥物：給藥方式，例如肌肉內給藥將直接影響分析結果。藥物本身也可干擾被分析物的測量。

　　1.1.3 藥物干擾

　　可分成兩大類：藥物的生理作用(體內)或代謝物對被分析物的影響

　　在體外，藥物及其代謝物的某些物理或化學性質也會干擾實際檢測過程。對檢測能產生顯著干擾的治療藥物是血紅蛋白類氧載體(HBOC)，例如血液增強劑Oxyglobin。它是從牛血清中發現的一種呈黑紅色的聚合血紅蛋白。因為這種化合物的固有顏色，Oxyglobin在治療貧血動物可造成相同于血漿/血清溶血的情況。它在血液學，生化和尿檢的結果中都產生了明顯的干擾，在生化檢測中的干擾取決于檢測方式和儀器的使用。制造商正在努力開發新的方法來補償或消除來自HBOCs的干擾，因此未來可能在給予HBOCs的動物中也能獲得精確的檢測結果。這提示我們血液樣品應在給予貧血動物HBOC之前收集，以盡量減少對檢測結果的影響。

　　實驗室應該被告知任何治療藥物的使用，以此可采取措施降低藥物造成的影響。然而，獸醫學中關于藥物對動物或分析技術有哪些影響還了解甚少，除了例如皮質類固醇，溴化物的例子。所以，任何異常的生化檢測結果應該結合動物完全的用藥史分析。

　　1.2 非生理性因素

　　非生理因素包括樣本采集，處理和運輸。應盡量控制這些因素以減少對實驗室結果的影響。

　　1.2.1 樣本采集

　　靜脈穿刺：清潔的靜脈穿刺是減少人為誤差的重要條件之一。錯誤的靜脈穿刺技術可能引起溶血，從而通過多種方式導致檢測結果產生誤差。例如高鉀紅細胞將導致鉀假性升高，紅細胞中AST導致AST假性升高(比如貓)，檢測過程中化學反應釋放相關成分導致CK假性增高。止血試驗中錯誤的靜脈穿刺產生的組織因子將污染樣品，導致樣品管中的沉淀凝血，以無法預知的方式延長或縮短凝血時間測定�？赏ㄟ^將血液直接收集到檸檬酸鹽抗凝血劑(預填充注射器或直接進入真空采血管)中減少誤差影響。

　　抗凝劑：抗凝劑將影響檢測結果。

　　血液檢測：最好使用EDTA抗凝血劑，檸檬酸鹽將稀釋樣本，肝素將引起細胞凝集，兩者都將減少計數。

　　生化檢測：肝素化血漿或血清(無抗凝血劑)樣品適用于生化檢測。因為同一患者的血漿與血清的檢測結果不同。所以如果需要連續監測同一患者，應使用相同的樣品。血漿里含有纖維蛋白原，而血清中沒有(在凝血期間移除)，因此檢測結果里血漿的總蛋白(和球蛋白，因為纖維蛋白原是β球蛋白)的結果比血清高。凝血期間鉀從血小板中釋放，因此血清鉀高于血漿鉀(后者結果更準確)。氟化物-草酸鹽抗凝劑可用于葡萄糖的測量，它會抑制細胞代謝，應馬上將血清/血漿從細胞分離，因為該抗凝血劑會誘發嚴重的溶血。檸檬酸鹽和EDTA抗凝劑不適用于生化檢測，因為它們會螯合二價陽離子(鈣，鎂)并含有高濃度的鈉(檸檬酸鹽)或鉀(EDTA)。即使是在輕度EDTA污染的血液樣品中進行生化檢測都會出現超高鉀和超低鈣的結果。一些酶的活性也需要二價陽離子。因此，在含有EDTA或檸檬酸鹽做抗凝劑的血漿中，這些酶(例如堿性磷酸酶)的檢查結果會虛假偏低。

　　凝血測試：最好使用檸檬酸抗凝劑(對鈣有輕度螯合作用，因此鈣可以回到樣本中以進行凝血篩選測定)。不能使用肝素(樣品不會凝結)，EDTA可以使用(鈣可以回到樣本中)，但不是很可靠所以不推薦使用。

　　1.2.2 樣本處理和儲存

　　樣品收集后，應嚴格注意樣品處理，以盡量減少這些因素對結果的影響。

　　分離：只要有可能，尤其是當樣品收集和實驗室送檢之間有延遲時，應在樣品收集后盡快分離細胞中的血清或血漿。包括使樣品凝結(對于血清)和離心樣品以分離出血液組分。應該將血清或血漿從細胞中分離并置于新的凝集(無抗凝血劑)管中。管應標記為“血漿”或“血清”。未與細胞分離的樣品具有較低的葡萄糖濃度(在儲存期間由細胞消耗)，即使沒有明顯的溶血，濃度較高的一些成分，將從紅細胞中滲出，例如馬血液中的鉀。血清分離器(或Corvac)的專用管，材料含有硅膠，可以將血清和凝塊分離。即使使用這些管，仍應該取出血清并放置到新的凝血管中，尤其當專用管不是全新狀態(硅膠如果裂開也將影響樣本)。

　　標記：患者的所有體液樣品應正確標記好患者姓名，標識和樣品類型(例如血清，血漿，滑液，腹膜液)。實驗室不負責樣品的正確標記，可以想象，一個不正確的標簽標本將對病人護理產生多么嚴重和有害的后果。

　　儲存：一般情況下，通常從樣品收集到實驗室送檢之間至少有24小時的延遲。因此，從細胞中快速分離血清/血漿和保持樣品冷卻(使用冰袋)對于保持酶活性最大化和防止結果出現誤差是非常有必要的。如果預計長時間(> 24小時)，建議將樣品冷凍，并使用干冰將樣品運輸至實驗室。樣本存儲的方法取決于樣本檢測類型，一些樣品凍結也不是很穩定，所以應該經常向實驗室咨詢不同樣本的儲存方法。

　　2、分析中因素

　　分析中因素通過影響儀器測量分析物的過程。由于儀器類型的差異，不同實驗室會對檢測結果產生不同影響。分析因素由樣品固有屬性引起，例如血脂的干擾，或分析儀本身的固有特征。儀器本身的誤差可通過實驗室的質量保證程序降至最小化。

　　干擾

　　脂血，游離血紅蛋白(溶血)，黃疸(高膽紅素)，高球蛋白和藥物，這些內源性物質對檢測結果的干擾程度取決于儀器類型、檢測方法以及樣品中的干擾物質數量(即實驗室特異性)。在康奈爾大學臨床病理學實驗室中使用的化學分析儀將測量樣品中脂血，溶血和黃疸的含量，并將這些值作為指數，用于評價這三種內源性干擾物質對化學結果的影響程度。

　　高蛋白血癥：單克隆免疫球蛋白(副蛋白)，特別是當以高濃度存在時，通過以下機制干擾生化分析：

　　高粘度：影響樣品體積，粘度取決于免疫球蛋白的類別(免疫球蛋白如何形成高粘度，為何形成?)

　　與被檢測物結合：與一些被檢測物結合的免疫球蛋白將增加或減少分析成分，例如已經有一例犬慢性淋巴細胞白血病和犬IgM單克隆丙種球蛋白病病例中發現了高磷酸鹽血。

　　體積變化：這類似于脂血癥的影響。什么疾病導致單克隆丙種球蛋白病?

　　藥物：給藥方式不同的藥物干擾可能使結果產生偏差。在獸醫學中最常見的藥物干擾之一是犬溴化物(抗驚厥藥)療法，檢測樣品的氯化物值將人為升高。臨床獸醫應該告知實驗室使用在待檢動物身上的的任何藥物，這有助于減少藥物對化學測試的影響(但通常不會消除)。

　　檢測程序

　　控制和最小化影響測定性能的因素包括質量保障。

　　臨床病理實驗室的目標是提供準確和精確的結果。質量保證是通過實施清楚明確的實驗室操作規程和質量控制程序來實現。

　　質量控制程序取決于測量對照血清中被分析物的濃度(同預定的分析物值對比)。通常落在預定(可接受)限度之外的控制值表示程序存在問題。康奈爾大學的臨床病理學實驗室每天都會對分析儀器進行對照檢測。除非對照值在可接受的范圍內，否則不對患者樣品進行分析。此外，實驗室參與外部質量控制計劃，分析未知樣品時候，會將結果與使用相同儀器的其他實驗室的結果進行比較。如果本校實驗室的結果與平均值的偏差較大，表明存在程序性問題，應即時糾正。

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