研究論文應當重視實驗動物應用狀況的描述
動物實驗是醫學研究常用的方法和手段,在人類疾病的調查和防治研究等諸多方面發揮著巨大作用。目前,國內外公認實驗動物質量的標準化與否直接影響著科學研究水平的高低,實驗動物水平應當與科學研究的水平相匹配。因此,人們愈來愈重視實驗動物的標準化問題。但是,醫學研究論文中對實驗動物應用狀況的描述尚未引起人們足夠的重視,而描述的狀況既從一個側面反映了實驗動物應用的情況,也反映了科研論文的規范化程度[1],并進而影響論文的質量和交流。作者通過對《中華醫學雜志》、《中華內科雜志》、《中華結核和呼吸雜志》、《中華病理學雜志》、《中華腫瘤雜志》、《中國病理生理雜志》、《中國應用生理雜志》、《解放軍醫學雜志》、《第三軍醫大學學報》和《第四軍醫大學學報》1991~1996年各期刊載的呼吸系統疾病論文為例進行調查,并隨機抽檢了《Respiration Physiology》、《European Respiratory Journal》、《American Review of Respiratory Disease》及《American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine》中應用實驗動物的文章。填寫問卷,依文獻計量學方法進行統計分析,結果如下:
1.10種雜志文獻中呼吸疾病所占數量有明顯差異,平均占總量的12.93%。其中《中華結核和呼吸雜志》中呼吸疾病占80.31%,《中華內科雜志》中占11.57%,《中華腫瘤雜志》中占10.11%,《中國病理生理雜志》中占9.55%,比例較高。《中華病理學雜志》中占7.96%,《中華醫學雜志》中占4.81%!吨袊鴳蒙黼s志》中占5.54%。而《第三軍醫大學學報》中占3.73%,《解放軍醫學雜志》中占2.31%,《第四軍醫大學學報》中占2.53%,比例較小。
2.約有1/4的研究論文是通過動物實驗進行研究工作的,幾乎涉及呼吸系統的各種疾病,主要以阻塞性肺氣腫、肺原性心臟病、支氣管哮喘、呼吸衰竭、肺癌為主。幾種雜志不平衡,《中國病理生理雜志》所占比例高達75.25%,《中國應用生理雜志》所占70.27%,比例較高,《第四軍醫大學學報》為62.07%,《第三軍醫大學學報》為48.00%,《中華醫學雜志》為32.76%,《解放軍醫學雜志》為18.52%,《中華結核和呼吸雜志》為13.15%。而《中華內科雜志》和《中華腫瘤雜志》較少,分別為7.74%和8.60%。這與各雜志刊文的側重點有關。
3.理想的動物模型應是規范化的,能夠準確地重復再現。為此,應嚴格控制影響因素,力求一致性。影響復制的因素可分為兩大類:動物因素和環境因素。動物因素包括遺傳因素、性別、年齡、疾病因素。環境因素包括營養、氣候、理化、居住因素。因此,研究論文中對這些因素均應描述。調查中發現文章標題作為研究核心,有39.08%的文章沒有注明實驗動物的種名,有些文章應用了不規范的俗名,如“大白鼠”、“小白鼠”等。24.43%的文章沒有交代實驗動物的品系、品種。57.47%的文章既不記敘實驗動物的來源,也不交代其遺傳背景。性別、年齡和體重因素,分別有31.32%、99.13%和13.79%的文章無記敘。一些文章實驗動物的數目偏少,不足以達到統計學的要求。有11.78%的文章甚至未提實驗動物的數目。當然,近交系動物可以突破統計學上的要求,但也必須滿足一定的數目。
4.動物實驗的條件:98.56%的文章根本不提及飼養方式,99.14%的文章對實驗環境未記敘,僅有1篇文章(占0.29%)提到了實驗動物的合格證。有5篇文章是應用裸鼠進行的實驗,其中僅1篇提及動物實驗條件。
5.動物實驗的處理方式:為不影響實驗結果和操作者安全,以及減少動物模型處理因素的干擾作用,對實驗動物進行恰當處理是必要的。調查中發現,57.76%的文章未記述麻醉劑,72.41%的文章未記述處死方式。有較多的文章寫著“處死后……”,但未談如何處死。有86.78%的文章敘述了施加實驗因素時所采用的方式,有61.49%的文章記述了所用動物模型的制法或依據,考慮到了采用不同的模型處理的結果會完全不同,如何實施實驗因素的方式是應當記敘的,但該調查中發現竟有13.22%的文章未談及。
6.動物實驗設計的問題:動物實驗設計也應當參照并遵守臨床實驗設計的三大原則[2]:隨機化、重復、對照。根據實驗動物的情況,有時還應當在最后采用雙因素方差分析。調查發現,45.40%的實驗未隨機分組,19.54%的實驗未設對照,全部文章均未使用雙盲法或采用雙因素方差分析。因此,在實驗設計上尚有值得改進的地方。
客觀地講,目前我國應用實驗動物的水平與發達國家(如美國,日本)還有一些差距,因為實驗動物的應用情況,受到國家相關的政策法規、經濟發展水平及科學技術水平等多重因素的影響。從隨機抽檢的文章[3~5]中可以看出,國外幾種與呼吸疾病相關的雜志對實驗動物的描述具有以下特點:(1)品種、品系描述清楚;(2)強調來源;(3)體重明確;(4)等級明確;(5)飼養環境和實驗環境明確;(6)性別明確;(7)有對飼養方式的描述(如飼料類型、營養水平、照明方式、溫度、濕度要求);(8)所用動物數量準確;(9)對動物的健康狀況的描述詳細;(10)對動物實驗的處理方式有單獨清楚的交代;(11)全部有對照,部分采用了雙因素方差分析。當然,國外雜志有些文章也有不足,比如對動物年齡描述不夠明確,也未見使用雙盲法。發達國家目前動物檢測工作有專門的機構,可以保證試驗結果的可靠性。
隨著實驗動物質量不斷提高,動物實驗條件的不斷改善,動物實驗應用領域也愈來愈廣泛。但是,許多動物實驗研究論文中往往將試劑生產地、產品批號等描述十分詳細,而對實驗動物的條件卻記述很少,甚至一些學術水平很高的科研論文,對實驗動物方面的記述也很簡單。這種狀況應當引起廣大科技人員的重視。
參考文獻
1 孫敬方,朱德生,郝光榮,等,主編.實驗動物學技術.北京:科學技術文獻出版社,1993.120-121.
2 曾紀霖.臨床實驗設計與總結中存在的一些問題的商討.中華結核和呼吸雜志,1992,15:240-243.
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4 Harris ZL, Ridge KM, Gonzalez-Flecha B, et al. Hyperbaric oxygen-ation upregulates rat lung Na, K-ATPase. Eur Respir J, 1996,9:472-477.
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