微生物細(xì)菌培養(yǎng)鑒定藥敏工作
【關(guān)鍵詞】病原微生物 細(xì)菌標(biāo)本 安全用藥 院感管理微生物細(xì)菌培養(yǎng)鑒定藥敏工作在臨床工作中具有非常重要的地位。微生物細(xì)菌的培養(yǎng)鑒定、藥敏工作應(yīng)從以下幾方面開(kāi)展：
1 臨床標(biāo)本的留取原則
1.1血液標(biāo)本 細(xì)菌培養(yǎng)鑒定藥敏：(1)病人發(fā)熱（38.5℃或寒戰(zhàn)、治療前1小時(shí)采集,可提高陽(yáng)性率。(2)盡量在使用抗生素前采血，成人：5-10ml，兒童：3-5ml。①?lài)?yán)格無(wú)菌操作。②注明科別、姓名、床號(hào)、采血時(shí)間，立即送檢。放入35℃溫箱培養(yǎng)一周。③盡量在使用抗生素前做，否則影響檢出。血液培養(yǎng)瓶從冰箱取出，應(yīng)放室溫20分鐘后使用。
1.2痰標(biāo)本 細(xì)菌真菌培養(yǎng)鑒定藥敏：清晨起床后用涼開(kāi)水反復(fù)漱口后,用力咳出肺深部的膿痰于無(wú)菌容器中（無(wú)菌痰杯）：(1)盡可能在服用抗生素之前采集標(biāo)本。(2)注明科別、姓名、床號(hào)、采集時(shí)間。(3)用標(biāo)本容器保溫立即送檢。接種35℃培養(yǎng)。痰標(biāo)本的采集以晨痰為準(zhǔn)。
1.3尿液標(biāo)本 細(xì)菌培養(yǎng)鑒定藥敏：清潔尿道口，棄去前段尿，留取中段尿(不要使用消毒劑清洗)（螺旋蓋無(wú)菌尿杯）5-10ml。(1)用藥之前進(jìn)行培養(yǎng)。(2)嚴(yán)格無(wú)菌操作。(3)收集新鮮尿液標(biāo)本后，立即送檢、接種。(4)尿中不得加防腐劑。(5)女性避免月經(jīng)期。(6)注明科別、姓名、床號(hào)、采集時(shí)間。
1.4糞便標(biāo)本 細(xì)菌培養(yǎng)鑒定藥敏：(1)在服用抗生素之前采集標(biāo)本。(2)注明科別、姓名、床號(hào)、采集時(shí)間，挑取新鮮糞便于無(wú)菌容器內(nèi)。(3)立即送檢。接種35℃培養(yǎng)。①必須是新鮮膿血便，②一定要在用藥前采集標(biāo)本。
1.5化膿創(chuàng)傷標(biāo)本 細(xì)菌培養(yǎng)鑒定藥敏：按醫(yī)生要求準(zhǔn)備一次性無(wú)菌采樣拭子(1)用藥之前采集標(biāo)本。(2)嚴(yán)格無(wú)菌操作,常規(guī)消毒病灶周?chē)つw。(3)開(kāi)放性感染先清洗創(chuàng)口，再用無(wú)菌拭子采集膿汁及病灶深部分泌物于無(wú)菌管中。(4)閉鎖性膿腫穿刺抽取標(biāo)本于無(wú)菌管中。(5)標(biāo)本采集后立即送檢。接種35℃培養(yǎng)。①當(dāng)創(chuàng)面出血或敷用藥后2小時(shí)內(nèi)不應(yīng)采集標(biāo)本，②一定要采集分泌物。
1.6燒傷標(biāo)本 細(xì)菌培養(yǎng)鑒定藥敏：按醫(yī)生要求準(zhǔn)備一次性無(wú)菌采樣拭子(1)嚴(yán)格無(wú)菌操作。(2)燒傷12小時(shí)后進(jìn)行采集創(chuàng)菌標(biāo)本。深I(lǐng)I度燒傷溶痂和深I(lǐng)II度變焦痂期后每天采集燒傷標(biāo)本。(3)標(biāo)本采集后立即送檢。接種35℃培養(yǎng)。
2 臨床細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本的處理
2.1嚴(yán)格無(wú)菌操作。
2.2采集臨床培養(yǎng)標(biāo)本時(shí)，一定要注明科別、姓名、床號(hào)、采樣時(shí)間、日期與醫(yī)生開(kāi)申請(qǐng)單一致，應(yīng)盡快送檢，檢驗(yàn)科人員及時(shí)接種，放入相應(yīng)溫度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18-24小時(shí)。
2.3盡可能在病人服用抗生素前或傷口局部治療之前采集標(biāo)本。
2.4不要在標(biāo)本中添加任何防腐劑，以免干擾病原菌分離。
2.5在采集或傳送過(guò)程中應(yīng)避免病原體擴(kuò)散和污染。 3 微生物各種標(biāo)本接種平皿程序
3.1驗(yàn)收標(biāo)本，是否合格。合格者，請(qǐng)?jiān)谏暾?qǐng)單上注明接種日期、時(shí)間、接種者。
3.2在微生物登記本上登記病人信息、編號(hào)。
3.3將接種平皿從2—8℃微生物室冰箱中取出，放置室溫后，在平皿上注明患者姓名、科別、接種日期。
3.4接種標(biāo)本必須在酒精燈下操作，嚴(yán)格無(wú)菌操作。按三區(qū)分段劃線法進(jìn)行接種。
3.5標(biāo)本接種完后，將中國(guó)蘭平/SS/血培養(yǎng)瓶放置35℃普通培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18-24小時(shí)。將巧克力和血平皿培養(yǎng)基放置CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18-24小時(shí)。
4 微生物各種標(biāo)本接種平皿、方法
4.1痰培養(yǎng)標(biāo)本接種平皿 血平皿、巧克力、中國(guó)蘭。痰培養(yǎng)標(biāo)本接種方法：用無(wú)菌棉棒將痰混勻，涂在上述平皿內(nèi)一角，涂勻，再用取菌環(huán)進(jìn)行三區(qū)分段劃線。
4.2尿培養(yǎng)標(biāo)本接種平皿 血平皿、巧克力、中國(guó)蘭。尿培養(yǎng)標(biāo)本接種方法：用加樣槍從滅菌盒中取出滴頭，加尿液10uL，再用取菌環(huán)進(jìn)行三區(qū)分段劃線。
4.3分泌物標(biāo)本接種平皿 血平皿、巧克力、中國(guó)蘭。分泌物標(biāo)本接種方法：直接用無(wú)菌采樣管中分泌物涂在上述平皿內(nèi)一角，涂勻，再用取菌環(huán)進(jìn)行三區(qū)分段劃線。
4.4引流液標(biāo)本接種平皿 血平皿、巧克力、中國(guó)蘭。引流液標(biāo)本接種方法：（同尿液）。用加樣槍從滅菌盒中取出滴頭，加引流液10uL，再用取菌環(huán)進(jìn)行三區(qū)分段劃線。
4.5便培養(yǎng)標(biāo)本接種平皿 SS平皿、中國(guó)蘭。便培養(yǎng)標(biāo)本接種方法：用無(wú)菌棉棒挑取大便，涂在上述平皿內(nèi)一角，涂勻，再用取菌環(huán)進(jìn)行三分段劃線。
5 常規(guī)微生物監(jiān)測(cè)在醫(yī)院感染管理作用
5.1開(kāi)展醫(yī)院感染病原微生物的培養(yǎng)、分離鑒定、藥敏實(shí)驗(yàn)的耐藥性監(jiān)測(cè)，定期總結(jié)、分析，向有關(guān)部門(mén)反饋。
5.2指導(dǎo)臨床合理使用抗生素。
5.3抗生素合理使用應(yīng)在全面了解患者、致病菌與抗生素三者的基本情況與相互關(guān)系的基礎(chǔ)上，安全有效使用抗生素，使病人在冒最小的危險(xiǎn)和損傷下，獲得最大的治療效益。同時(shí)減少醫(yī)院感染發(fā)病率。
6 微生物室的臨床檢驗(yàn)任務(wù)
6.1建立正確、快速的檢驗(yàn)方法、分離鑒定方法、藥敏實(shí)驗(yàn)方法。
6.2與臨床科室建立密切聯(lián)系，指導(dǎo)臨床合理用藥。
做好微生物細(xì)菌培養(yǎng)鑒定、藥敏工作，首先嚴(yán)格按要求采集合格標(biāo)本，做到設(shè)備完善，較高的技術(shù)人員水平。嚴(yán)格無(wú)菌操作，確保生物安全工作。為臨床診斷疾病、合理使用抗生素，提供科學(xué)可靠依據(jù)，同時(shí)做好醫(yī)院的院感工作。
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