初探影響食品微生物檢驗(yàn)的幾點(diǎn)因素
【摘要】 本文從人員、設(shè)施、環(huán)境等方面闡述了影響食品微生物檢驗(yàn)的幾點(diǎn)因素，以確保食品微生物檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確可靠。【關(guān)鍵詞】 無(wú)菌 微生物 檢驗(yàn)
【Abstract】 The article make the exploration about a few factors including human, facilities, environment that should influence the examination about the food microorganism，to ensure the accuracy of the data of the examination of the food microbiological.
【Key words】 Asepsis Microorganism Examination
食品微生物檢驗(yàn)的目的就是要為生產(chǎn)出安全、衛(wèi)生、符合產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)的食品提供科學(xué)依據(jù)。因而對(duì)食品微生物進(jìn)行檢驗(yàn)至關(guān)重要。本人就如何保證食品微生物數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性應(yīng)注意的幾點(diǎn)因素談?wù)勛约旱恼J(rèn)識(shí)。
1 人的因素
為了保證微生物檢驗(yàn)的高質(zhì)量，要求檢驗(yàn)人員的知識(shí)結(jié)構(gòu)、專(zhuān)業(yè)技術(shù)能力和檢驗(yàn)的高水平。微生物檢驗(yàn)工作人員不僅要有專(zhuān)業(yè)知識(shí)和熟練的技術(shù)，而且還必須具備對(duì)工作的高度責(zé)任感和實(shí)事求是的科學(xué)工作作風(fēng)。確保實(shí)驗(yàn)室人員得到及時(shí)培訓(xùn)及不斷更新知識(shí)，學(xué)習(xí)和掌握新理論、新技術(shù)和新方法。保存技術(shù)人員有關(guān)資歷、培訓(xùn)、技能和精力等技術(shù)業(yè)績(jī)檔案。
2 設(shè)施、環(huán)境
實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具有進(jìn)行微生物檢驗(yàn)適宜充分的設(shè)施條件，包括檢測(cè)設(shè)施(專(zhuān)用于微生物檢測(cè)和相關(guān)活動(dòng))及輔助設(shè)施(大門(mén)、走廊、管理區(qū)、樣品區(qū)、清潔間)特殊的設(shè)備要在特殊的環(huán)境下放置和操作。
2.1無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)應(yīng)符合GB19489的規(guī)定，符合無(wú)回路的原則。設(shè)有人流和物流通道。
2.2 在時(shí)問(wèn)和空間上有效隔離各種檢測(cè)活動(dòng)。
2.3 為保證檢測(cè)樣品的完整性，操作時(shí)應(yīng)按照規(guī)定的程序并采取預(yù)處理措施。
2.4 無(wú)菌區(qū)(檢驗(yàn)區(qū))。
(1)紫外線(xiàn)消毒：在室溫下，220V，30W紫外燈下方垂直位置 lm處的253.7nm紫外線(xiàn)輻射強(qiáng)度應(yīng)≥70μW／cm2，低于此值時(shí)應(yīng)更換，適當(dāng)數(shù)量紫外燈，確保平均每立方米應(yīng)不少于1.5W。紫外線(xiàn)消毒時(shí)無(wú)菌室內(nèi)應(yīng)保證清潔干燥在無(wú)人條件下可采取紫外線(xiàn)消毒，作用時(shí)間為30min。人員在關(guān)閉紫外燈至少30min后方可入內(nèi)作業(yè)。
(2)臭氧消毒：封閉無(wú)菌室內(nèi)，無(wú)人條件下，采用20mg／m3濃度的臭氧作用時(shí)間應(yīng)≥30min，消毒后室內(nèi)臭氧濃度≤0.2mg,／m2時(shí)方可人內(nèi)作業(yè)。
(3)無(wú)菌室空氣滅菌效果驗(yàn)證方法(沉降法)：一般情況下無(wú)菌室面積≤30m2時(shí)從所設(shè)定的一條對(duì)角線(xiàn)上選取3點(diǎn)，即中心l點(diǎn)、兩端各距墻1米處各取一點(diǎn)；無(wú)菌室面積≥30m2時(shí)選取東、南、西、北、中點(diǎn)均距墻lm各取一點(diǎn)。
在所選位點(diǎn)，將平板(90mm2的)距地面80厘米處開(kāi)蓋暴露l5min，置于36±1℃，恒溫培養(yǎng)48h±lh，確認(rèn)平板上的菌落數(shù)，如大于所設(shè)定的風(fēng)險(xiǎn)值應(yīng)分析原因并采取適當(dāng)措施。
2.5 通過(guò)以下途徑減少污染：
(1)表面光滑的墻、天花板、地面和桌椅。(2)地面、墻壁、天花板連接處應(yīng)有弧，地面應(yīng)防滑。(3)當(dāng)進(jìn)行檢測(cè)時(shí)應(yīng)關(guān)閉門(mén)窗。(4)換氣系統(tǒng)應(yīng)有空氣過(guò)濾裝置。(5)獨(dú)立的洗手池。(6)固定設(shè)備和室內(nèi)裝置的木質(zhì)表面應(yīng)密閉包裹。(7)不使用粗糙而裸露的木塊。(8)檢驗(yàn)室內(nèi)不得堆放雜物。
3 設(shè)備及藥品配置
3.1培養(yǎng)箱、水浴箱、干熱滅菌箱和高壓滅菌鍋：
①首次安裝時(shí)要對(duì)溫度的穩(wěn)定性和一致性進(jìn)行校準(zhǔn)。②記錄培養(yǎng)箱、水浴鍋和干熱滅菌箱的溫度穩(wěn)定性達(dá)到平衡所需的時(shí)間。③每次經(jīng)檢定合格后方能使用，并對(duì)這些設(shè)備的運(yùn)行溫度進(jìn)行記錄。④定期清潔和消毒內(nèi)外壁。⑤高壓滅菌鍋的時(shí)間和溫度指示的準(zhǔn)確度應(yīng)滿(mǎn)足要求，不能僅依靠高壓鍋的壓力表測(cè)定時(shí)間，應(yīng)使用感應(yīng)器控制和監(jiān)控運(yùn)轉(zhuǎn)循環(huán)情況。 3.2藥品配置：
①培養(yǎng)基通常采用高壓濕熱滅菌法，121℃滅菌15min，特殊培養(yǎng)基按使用者的特殊要求進(jìn)行滅菌(如含糖培養(yǎng)基ll5℃滅菌20min。②部分培養(yǎng)基(如嗜鹽瓊脂培養(yǎng)基、膽硫乳培養(yǎng)基等)，只能煮沸滅菌。③對(duì)熱敏感的培養(yǎng)基或添加物應(yīng)采用膜過(guò)濾方法進(jìn)行過(guò)濾除菌。
3.3器具
①濕熱滅菌：采用高壓滅菌器121℃滅菌20min，適用于玻璃器皿、移液器吸頭、塑料瓶等。按照GB15981的規(guī)定評(píng)價(jià)高壓滅菌器的殺菌效果。在高壓滅菌時(shí)注意滅菌物品不要相互擠壓過(guò)緊，以保證蒸汽通暢，使所有物品的溫度均上升，才能達(dá)到徹底滅菌的目的。②干熱滅菌：采用干燥箱滅菌160℃滅菌2h，180℃滅菌1h適用于玻璃器皿、不銹鋼器具等。
4 樣品的采集、運(yùn)輸和保存
樣品的采集必須具有代表性，要考慮到各種影響樣品質(zhì)量的因素，防止樣品受到外源性污染，防止樣品變質(zhì)和細(xì)菌生長(zhǎng)。采樣必須在無(wú)菌操作下進(jìn)行，所謂無(wú)菌操作是指杜絕任何病原性或非病原性微生物進(jìn)入樣品。采樣用具及包裝物必須是滅菌的。冷凍食品保持冷凍狀態(tài)；非冷凍食品需保持在(0～5)℃中保存。樣品的運(yùn)輸和保存應(yīng)避免日光照射，必須防止外來(lái)物的污染。樣品從采樣點(diǎn)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)越快越好，一般不超過(guò)3h，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作應(yīng)盡快進(jìn)行，長(zhǎng)時(shí)間冷凍可導(dǎo)致微生物死亡，反復(fù)冷凍和融化對(duì)微生物也有很大影響必須盡快進(jìn)行檢測(cè)。
5 操作
(1)操作人員必須牢固樹(shù)立無(wú)菌觀念，整個(gè)操作均要求無(wú)菌操作，盡量靠近火焰，動(dòng)作要迅速，從微生物的分離、純化到接種，手法規(guī)范。嚴(yán)格按照GB/T4789食品微生物檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)中的操作規(guī)程進(jìn)行檢驗(yàn)。
(2)進(jìn)入無(wú)菌室從樣品的制備到檢驗(yàn)都要為防止二次污染采取必要措施，如樣品及器皿擺放整齊便于操作，操作過(guò)程熟練。
(3)樣品取樣時(shí)用無(wú)菌工具無(wú)菌操作取樣。
(4)原始記錄要真實(shí)準(zhǔn)確，不得隨意填寫(xiě)。按照GB/T4789標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理及結(jié)果判定。
綜上所述，只要我們遵守職業(yè)道德，嚴(yán)謹(jǐn)科學(xué)態(tài)度，注意以上幾個(gè)環(huán)節(jié)就能使我們微生物檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性得以保證，以把好食品衛(wèi)生和安全提供可靠依據(jù)。
參 考 文 獻(xiàn)
[1] 李勇.實(shí)驗(yàn)室生物安全[M].第1版.北京：軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)出版社，2009,09.
[2] 齊小秋.病原微生物檢驗(yàn).衛(wèi)生部病原微生物檢驗(yàn)教材編寫(xiě)組，2009,02.
[3] 李志勇，謝均憲，許龍巖.食品微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制[J].檢驗(yàn)檢疫科學(xué)，2004,14(4).
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