生殖道標(biāo)本的微生物檢驗(yàn)
生殖道標(biāo)本的檢驗(yàn)是臨床檢驗(yàn)的重要組成部分,近年來(lái)由于性傳播疾病呈上升趨勢(shì),加之抗生素不合理使用,生殖道疾病逐年增加,如何對(duì)標(biāo)本采集時(shí)間不當(dāng),標(biāo)本不及時(shí)送檢、標(biāo)本不合格、采集不規(guī)范等因素進(jìn)行指導(dǎo)和控制是保證檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的重要手段,應(yīng)當(dāng)引起臨床醫(yī)生和檢驗(yàn)工作者的重視。下面是yjbys小編為大家?guī)?lái)的關(guān)于生殖道標(biāo)本的微生物檢驗(yàn)的知識(shí),歡迎閱讀。
1 送檢指征
1.1 全身癥狀 生殖系統(tǒng)感染多不伴發(fā)熱,但在感染活動(dòng)期或發(fā)生播散性感染時(shí)可發(fā)熱,但往往發(fā)熱與乏力同時(shí)存在,此外某些感染梅毒等累及神經(jīng)時(shí)雖不發(fā)熱,但也會(huì)出現(xiàn)全身乏力,急性期或慢性消耗感染者,可能累及胃腸道出現(xiàn)厭食等。
1.2 皮膚黏膜損害 斑疹、丘疹、 結(jié)節(jié)、水皰、囊腫、 糜爛、潰瘍等的出現(xiàn),或由損害發(fā)展而來(lái)有萎縮、癍痕患者出現(xiàn)疼痛、瘙癢癥狀。
1.3 男性泌尿生殖系統(tǒng)表現(xiàn) 尿痛、尿頻、尿急、尿道分泌物增多,會(huì)陰部疼痛及陰囊疼痛、性功能障礙,甚至泌尿生殖器畸形和缺損。
1.4 女性生殖系統(tǒng)表現(xiàn) 陰道分泌物增多及性狀異常、陰道瘙癢及膿性分泌物流出、下腹疼痛、月經(jīng)失調(diào)、外陰瘙癢、疼痛或性功能障礙。
2 采集標(biāo)本
女性尿道應(yīng)排尿1h后采集,先拭去尿道口的滲出物,再用拭子通過(guò)陰道靠著恥骨聯(lián)合按摩尿道采集分泌物,或者清洗尿道,用滅菌紗布或棉球擦拭,用泌尿生殖拭子插入尿道2~4cm旋轉(zhuǎn)拭子2s,男性尿道用生殖道拭子插入尿道腔2~4cm,旋轉(zhuǎn)拭子至少停留20s,使之容易吸收。
陰道分泌物應(yīng)先擦除過(guò)多分泌物和排出液,用無(wú)菌棉拭子采取陰道口內(nèi)側(cè)壁或后穹隆處分泌物,如果需要涂片再用一個(gè)拭子。
宮頸分泌物先用無(wú)潤(rùn)滑劑的擴(kuò)陰器使宮頸可見(jiàn)。用拭子擦去黏液和分泌物丟掉,用新的.滅菌拭子插入宮頸管2cm采取分泌物,轉(zhuǎn)動(dòng)并停留10~20s,讓拭子吸附分泌物置無(wú)菌管內(nèi)送檢。
男性前列腺應(yīng)清洗尿道口,沖洗尿道膀胱,按摩前列腺,用無(wú)菌容器收集送檢。
3 注意事項(xiàng)
生殖器是開(kāi)放性器官,標(biāo)本采集過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作以減少雜菌污染,以免造成檢驗(yàn)結(jié)果不真實(shí)性,導(dǎo)致臨床診斷出現(xiàn)偏差。
陰道內(nèi)有大量正常菌群存在,采取宮頸標(biāo)本應(yīng)避免觸及陰道壁。
沙眼衣原體在宿主細(xì)胞內(nèi)繁殖,取材時(shí)拭子應(yīng)在病變部位停留十幾秒,盡可能采集上皮細(xì)胞。
疑有厭氧菌感染,應(yīng)在床邊采樣,直接做厭氧培養(yǎng),避免標(biāo)本與氧氣接觸。
4 檢驗(yàn)方法和報(bào)告方式
4.1 直接檢查 將合格標(biāo)本直接涂于清潔玻片上,用滅菌生理鹽水混勻,加蓋玻片鏡檢,可初步報(bào)告清潔度、線索細(xì)胞、細(xì)胞數(shù)量、 形態(tài)及運(yùn)動(dòng)性,若發(fā)現(xiàn)大量的發(fā)亮的芽生孢子及假菌絲,提示念珠菌感染,可用暗視野顯微鏡觀察螺旋體。
4.2 革蘭染色鏡查 觀察形態(tài)及染色性,炎癥細(xì)胞數(shù)量及線索細(xì)胞,有無(wú)念珠菌、假菌絲及孢子等。
4.3 報(bào)告方式 若在白細(xì)胞或上皮細(xì)胞內(nèi)見(jiàn)到革蘭陰性球菌成對(duì)排列可報(bào)告“找到革蘭陰性雙球菌”;若找到假菌絲和孢子可初步診斷為念珠菌感染。
5 分離、培養(yǎng)
直接接種血平板和中國(guó)蘭平板,并且同時(shí)進(jìn)行增菌培養(yǎng)。若為革蘭陰性桿菌按氧化酶陽(yáng)性或陰性及葡萄糖的利用實(shí)驗(yàn)鑒定到種。若為革蘭陽(yáng)性菌則按相關(guān)操作程序進(jìn)行鑒定。
淋病奈瑟菌培養(yǎng)是淋病診斷的重要佐證,目前國(guó)外推薦的選擇培養(yǎng)基有TM和NYC,這些培養(yǎng)基均含有抗生素,可選擇抑制許多其他細(xì)菌,經(jīng)過(guò)一定條件培養(yǎng),根據(jù)菌落形態(tài)、革蘭染色、氧化酶試驗(yàn)、葡萄糖發(fā)酵等鑒定,男性患者陽(yáng)性率為80%~95%。女性患者陽(yáng)性率為80%~90%。
superoxol試驗(yàn)與觸酶實(shí)驗(yàn)類(lèi)似,但是用30%過(guò)氧化氫溶液進(jìn)行,此實(shí)驗(yàn)可區(qū)分淋病奈瑟菌和其他奈瑟菌相關(guān)菌種。
沙眼衣原體用特異性抗體檢測(cè)抗原的血清方法。
支原體用衣原體檢測(cè)試劑盒。
6 藥敏實(shí)驗(yàn)及注意事項(xiàng)
采用紙片擴(kuò)散法進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn),藥敏紙片及M-H瓊脂均購(gòu)自北京天壇藥物生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司。
每批培養(yǎng)基制備應(yīng)檢查M-H瓊脂的pH值,pH過(guò)低、過(guò)高都能使某些藥物失去效力,而使另一些藥物活性增高。
藥敏紙片應(yīng)冷凍保存,在使用前1~2h移出冰箱,平衡至室溫后才能打開(kāi),防止熱空氣接觸冷紙片時(shí)產(chǎn)生冷疑水,降低含量。
7 討論
生殖道標(biāo)本的微生物檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性關(guān)鍵在于標(biāo)本的采集的真實(shí)性、可靠性。如果標(biāo)本采集不合格,再好的檢驗(yàn)人員也無(wú)法得出正確的結(jié)論。
由于抗生素的大量使用,細(xì)菌對(duì)藥物的耐藥性不斷增強(qiáng),這已成為生殖道抗感染治療的嚴(yán)重問(wèn)題,作為者應(yīng)積極協(xié)調(diào),主動(dòng)配合醫(yī)生,建議患者在使用抗生素前做微生物學(xué)檢查、培養(yǎng),得到真實(shí)的結(jié)論提高診斷率,合格用藥,減少病人精神痛苦和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),更好地為臨床服務(wù)。
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