酶法制備阿莫西林的工藝優(yōu)化研究
摘 要：阿莫西林在臨床上是一種十分常見的抗菌類藥物，當(dāng)前在制備方法上也有了非常顯著的進步，一般在制備阿莫西林的過程中主要采用兩種方法，一種是酶法，一種是化學(xué)法，相比較而言，酶法應(yīng)用的深度和廣度都是不如化學(xué)法的，但是酶法的工藝優(yōu)勢卻十分的明顯，所以，我們也可以基本斷定酶法是阿莫西林制備的一個重要的發(fā)展方向。本文主要分析了酶法制備阿莫西林的工藝優(yōu)化，以供參考和借鑒。
關(guān)鍵詞：酶法;制備工藝;優(yōu)化方案;阿莫西林
阿莫西林在抗生素類藥物中扮演著十分重要的角色，當(dāng)前，阿莫西林的市場需求在不斷的加大，在這樣的情況下，必須要不斷的完善阿莫西林制備的工藝和水平，只有這樣，才能更好的保證阿莫西林的質(zhì)量。當(dāng)前化學(xué)法在應(yīng)用中具有較強的廣泛性，這種方法成熟度雖然已經(jīng)很高，但是它依然存在著諸多方面的不足，其生產(chǎn)的周期比較喜歡哪個，生產(chǎn)效率也不是很高，生產(chǎn)過程中所需要的成本相對也多，此外還會產(chǎn)生很多對人體產(chǎn)生傷害的物質(zhì)，所以在制造中如果可以使用其他方法，盡量不要采用這種方式，當(dāng)前，越來越多的人都比較贊同使用酶法來制備阿莫西林，這主要是由于采用這種方法只需要在原材料當(dāng)中加入適量的催化劑就能夠達到制備的目的'，生產(chǎn)中周期較短，同時使用的試劑也五毒無害，生產(chǎn)中安全性和穩(wěn)定性更高，因此也應(yīng)該受到人們的關(guān)注和重視。
一、試驗部分
1.1 試驗材料與儀器設(shè)備
所選用的試驗材料為青霉素G�；浮αu基苯甘氨酸甲酯、6-APA以及其他一些必備的原料。所選用的儀器設(shè)備包括酶反應(yīng)器、高效液相分析儀、生物顯微鏡、循環(huán)冷凍機、電熱真空干燥箱以及PH計等多種儀器設(shè)備。其中所有的試劑均符合藥典相關(guān)要求，所有的儀器設(shè)備均為化學(xué)試驗的標(biāo)準儀器設(shè)備，且性能良好，可以用于本試驗的研究。
1.2 試驗方法
1.2.1 利用酶法制備阿莫西林
在試驗的過程中首先需要精確稱取適量的固態(tài)青霉素G�；�，此外還要使用清水做好其情節(jié)工作，之后要將其放入到酶反應(yīng)器當(dāng)中，將水分充分的去除。其次是要嚴格根據(jù)已經(jīng)設(shè)計好的比例精確稱取適量的對羥基苯甘氨酸甲酯和6-APA，將二者采用合理的方式充分的混合搖勻，同時還要使用鹽水稀釋到規(guī)定的濃度，并將其定容。之后再將這一溶液倒入已經(jīng)加入了G酰化酶的酶反應(yīng)器當(dāng)中。再次是將反應(yīng)器打開，使其充分的攪拌，在攪拌當(dāng)中，攪拌的速度必須要保證在400轉(zhuǎn)/分鐘，為了保證溶液自身的PH值可以滿足試驗的要求，我們可以采用3mol/L的氨水對其PH值進行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。在溫度控制方面可以采用循環(huán)冷凍機對溫度加以控制。第四是在對溶液中6-APA的轉(zhuǎn)化率進行測定的過程中要合理的使用高效液相色譜儀。剛開始反應(yīng)的時候檢測的時間間隔可以設(shè)定為半小時，在反應(yīng)的后期需要將時間間隔調(diào)整為10分鐘，如果發(fā)現(xiàn)其轉(zhuǎn)化率已經(jīng)穩(wěn)定在一個水平，就可以完成檢測工作。結(jié)束反應(yīng)過程。第五是這個時候，酶反應(yīng)器當(dāng)中會有一定的成分殘留，在研究的過程中，我們可以充分的利用酶反應(yīng)器底部的篩網(wǎng)將懸浮液和殘渣充分的分離，之后再將懸液倒入燒杯當(dāng)中進行冷卻，等到混懸液的溫度達到5℃的時候就可以使用濃度為10%的鹽酸，直到其呈現(xiàn)出澄清的狀態(tài)就可以停止添加鹽酸。第六是將上述澄清的溶液倒放入到抽濾瓶當(dāng)中進行有效的抽濾處理，之后還要將其放到燒杯當(dāng)中靜置半個小時，在這一過程中應(yīng)該滴入適量的氨水，直到溶液的PH值為5.1，養(yǎng)晶的時間大約為4個小時，之后還要進行清洗處理，處理后要在溫度為45℃的條件下進行干燥處理，最終得到成品的阿莫西林。
1.2.2 穩(wěn)定性試驗
取出上述方法制取的阿莫西林適量，對其進行穩(wěn)定性試驗，同時還要將相同生產(chǎn)日期的化學(xué)法制備出來的阿莫西林當(dāng)成對照品，采用加速試驗的方法進行測定，首先要精確稱取上述樣品30g，同時還要將其分別放入到袋子中進行密封處理，之后要放在溫度為40℃濕度為75%±10%的恒溫箱當(dāng)中對其進行全面的加速試驗，試驗的周期定位6個月。之后再采用要點方法對不同的指標(biāo)變化狀況進行檢測和觀察。
二、結(jié)果與討論
2.1 合成工藝優(yōu)化
2.1.1 固定化青霉素�；竿睹噶�。在HPGM：6-APA=2：1，溫度15℃，pH6.5條件下，投酶量分別為2.0、2.5、3.0、3.5KU/L，檢測6-APA轉(zhuǎn)化率，終點時取樣檢測阿莫西林合成收率。結(jié)果顯示投酶量在2.5KU/L以上，基本可以達到最大合成反應(yīng)收率，進一步提高投酶量對合成反應(yīng)收率沒有明顯影響(圖1)。
2.1.2 HPGM和6-APA投料比。在投酶量3.0KU/L，溫度15℃，pH6.5條件下，HPGM：6.APA分別為1.2、1.5、1.8、2.1，檢測6-APA轉(zhuǎn)化率，終點時取樣檢測阿莫西林合成收率。結(jié)果顯示HPGM：6-APA達1.5以上，可達到最大合成反應(yīng)收率(圖2)。
2.1.3 反應(yīng)溫度。在投酶量3.0KU/L，HPGM：6-APA=2.0：1，pH6.5條件下，溫度控制10、12、14、16、18、20℃，檢測6-APA轉(zhuǎn)化率，終點時取樣檢測阿莫西林合成收率。結(jié)果顯示溫度控制在12～160℃，可以達到相對較高的反應(yīng)收率。
2.1.4 反應(yīng)pH值。在投酶量3.0KU/L，HPGM：6.APA=2.0：1，溫度控制12℃條件下，pH控制在6.0、6.5、7.0、7.5、8.0，檢測6-APA轉(zhuǎn)化率，終點時取樣檢測阿莫西林合成收率。結(jié)果顯示pH控制在6.0～6.5，可以達到相對較高的反應(yīng)收率。
綜合上述因素，在投酶量3.0KU/L，側(cè)鏈：6-APA=1.5：1，溫度12℃，pH6.5條件下反應(yīng)2h，取樣檢測6-APA轉(zhuǎn)化率95.67%，阿莫西林生成率92.54%，最終阿莫西林成品摩爾收率84.3%。
之后為了進一步確定酶法工藝的可靠性，我們對其進行了為期6個月的加速試驗，試驗結(jié)果表明，酶法阿莫西林的穩(wěn)定性較好，符合相關(guān)規(guī)定的要求。
三、結(jié)論
在阿莫西林制備中，采用酶法制備具有非常大的優(yōu)勢，這種制備方法要比化學(xué)法效率更高，同時操作也更加簡單，安全性也更強，此外，晶體的大小對藥品自身的質(zhì)量和穩(wěn)定性也有著非常顯著的影響，大晶體要比小晶體的效果更好，療效也能得到保障。在化學(xué)法制備當(dāng)中，晶體要更小一些，所以在阿莫西林制備的過程中，采用酶法要更有優(yōu)勢，所以也值得在醫(yī)藥行業(yè)大力的推廣和普及。
除此之外，酶法在制備阿莫西林時不需要使用一些帶有毒性的試劑，工藝路線更為簡單，操作無危險，也不會給人體或環(huán)境造成危害，就從可持續(xù)發(fā)展的長遠角度來看，酶法也是一種有很大發(fā)展前景的工藝方法，需要我們進一步的對其工藝進行優(yōu)化，以提高工藝水平。
參考文獻：
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