- 相關推薦
信息化背景下談化工檢驗薄層色譜分離技術論文
前言
平面色譜法又包括紙色譜法和薄層色譜法。薄層色譜法是用載板上涂布或燒結一薄層物質作為固定相的液相色譜法。應用最多的是以硅膠為固定相的吸附薄層色譜法。薄層色譜與紙色譜相比，具有分析時間較短、分離能力較強，檢出靈敏度較高的特點。20世紀60年代以來已取代了部分紙色譜的工作。又由于薄層色譜實現了儀器化，自動化程度提高，測定精度及靈敏度都有很大提高，至今仍充滿活力。
1 色譜原理
色譜這一概念首先由俄國著名植物學家Tswett提出，在研究植物色素組成時發現了色譜分離的潛力，首次提出了色譜法這一概念。色譜法（chromatography）是一種分離并分析復雜樣品的方法，在化學和生物等領域有著廣泛的應用[1]。它主要利用復雜樣品本身性質的不同，在不同相態的進行選擇性分配，以流動相和固定相的相互位移對復雜樣品中的單一樣品進行分類洗脫，復雜樣品中不同的物質會以不同的洗脫速度在不同的時間上脫離固定相，最終達到分離復雜樣品的效果。
薄層色譜法具有眾多的優點：速度快，可同時展開多個試樣；試樣預處理簡單，對試樣限制少；儀器簡單，操作方便；分離能力較強且靈敏度較高。因此，其使用范圍廣，使用頻率高，已廣泛地應用于中藥指紋圖譜分析、食品添加劑分析、環境科學和化學化工等領域。
2 色譜技術在生產中的應用
2.1 精細化工領域
隨著色譜分離技術研究的不斷深入，尤其集成化和規模化色譜分離技術的應用，使得色譜分離技術在精細化工領域應用越來越廣泛，尤其在發掘工業生產過程中，色譜分離技術尤為重要。在發掘工業領域，發酵液成分復雜，雜質多樣，而目標樣品往往含量較低，如何實現目標成分的高效分離分析，對于該行業的發展起著關鍵作用。
2.2 醫藥領域
隨著醫藥現代化生產的不斷發展，對于醫藥組分的分離與單一成分研究要求越來越高。但由于藥學成分提取復雜，有效成分含量較低等原因，因此需要更為嚴格的分離分析手段進行藥效成分的分離和含量測定。目前在醫藥成分分離分析領域主要應用到的色譜技術主要包括薄層色譜，氣相色譜和毛細管電泳技術。而隨著現代分析儀器的不斷發展，尤其中藥及天然藥物藥效成分組成極其復雜，對其分離要求也愈發嚴格，需要發展更為精密的色譜技術，如超臨界色譜，高效逆流色譜，高效毛細管電泳和色譜-質譜聯用技術。
2.3 蛋白質組學研究
色譜技術除了在工業生產中有著廣泛的應用之外，在微觀大分子分離領域也有著重要的應用。例如蛋白質組學研究中，色譜分離技術也有著重要應用。目前對于蛋白質組的分離研究，主要有雙向電泳技術和高效液相色譜技術。其中雙向電泳技術根據蛋白質的分子量及等電點在二維領域將蛋白質進行分離，可以直觀顯示生物體內的蛋白質組成，雙向電泳結合質譜技術已成為蛋白質組學研究的一個成熟的研究平臺。
3 化工檢驗薄層色譜分離技術
將樣品溶液點于預先涂布有固定相（如硅膠）薄層板一端適當的位置，將板置于層析缸中，使點有試樣的一端浸入流動相（展開劑）中，由于薄層的毛細管作用，展開劑沿薄層漸漸上升，試樣的各組分沿著薄層在固定相和流動相之間不斷發生溶解、吸附、再溶解、再吸附。由于各組分的分配系數不同使它們在薄層上移動的距離也不同，從而達到分離。展開劑上升到一定距離時，從層析缸中取出薄層板。如果組分是有色的，就可以看到各個色斑，如果組分無色，要用物理的或化學的方法顯色，得到一個薄層色譜圖。
3.1 薄層色譜操作方法[2]
薄層色譜的實驗步驟有：制板、點樣、展開、顯色、定性和定量。
3.2 薄層板的制備
將平板玻璃裁成正方形或長方形，一般分析用20cm×20cm和20cm×10cm兩種。將玻璃片洗凈烘干。通常采用濕法制板，它具有薄層牢固、可批量制備、展開后便于保存、分離效果好等優點。
3.3 點樣
樣品用適當的有機溶劑制成溶液，濃度約為0.5～2mg/ml。點樣量為0.5～5ul，在距薄層板底邊1cm處點樣，原點直徑在3～4mm。手工點樣用微量注射器。如用點樣儀點樣，樣量精確、形狀整齊一致，能提高定量分析的準確度。
3.4 展開
展開的實驗操作是，將點樣后的薄層板置于密閉的層析槽中，下端浸入展開劑高度不應超過0.5cm。展開距離一般為10～15cm，根據溶劑移動的方向分為上行展開和下行展開。另外，還可利用多次展開、雙向展開等方法得到不同的層析結果。
3.5 定位與顯色
確定被分離組分的位置稱為定位。展開后的薄層板自槽中取出，室溫下揮發去溶劑。若被分離組分本身有顏色，它們的位置根據有色的斑點即可確定。無色的化合物可采用物理檢出法、化學檢出法、酶與生物檢出法和放射檢出法來定位。
3.6 定性
試樣與標準品同板作對照試驗，二者只f值相同且顯色特性相同，可初步認為是同一化合物。必要時采用其他方法加以驗證。
3.7 定量
�。�1）洗脫法。把組分斑點的吸附劑取出，用溶劑洗脫后，用其他方法測定。如分光光度法、熒光等方法測定。此法操作復雜，效率較低。
�。�2）原位法。即在薄層上組分斑點位置進行測定。又分為目測法、測面積法和薄層掃描儀掃描定量法。
4 結束語
綜上所述，本文介紹了薄層色譜的操作流程、薄層色譜掃描儀的工作原理和原油組分的薄層色譜分離方法。薄層色譜用于定量分析時，最好采用高效薄層色譜法，即采用分離效率高、展開距離短，靈敏度高的高效薄層板。且點樣、展開、顯色、定量均使用儀器。高效薄層色譜法的應用大大提高了薄層分析的重現性和準確度。
參考文獻
[1] 孫秀敏，張敏.薄層色譜分離技術[J].甘肅科技，2009，25（3）：31.
[2] 李凱.薄層色譜方法的改進[J].實驗室科學，2008，（1）：163-166.
【信息化背景下談化工檢驗薄層色譜分離技術論文】相關文章：
信息化背景下的機電教學探究論文08-09
信息化背景下的小學教育創新模式論文04-23
信息化背景下的機電教學研究論文07-23
清喉消炎顆粒的薄層色譜鑒別10-13
現代信息技術背景下的小學音樂的論文05-01
談體驗旅游背景下導游的發展方向07-27
談電子商務背景下的網絡營銷08-13
社會背景下的成人教育論文10-14
信息化環境下審計論文10-02