溫通法對S-荷瘤小鼠的抑瘤作用的實(shí)驗(yàn)探試究
摘要:目的 研究溫通法對小鼠s 肉瘤的抑瘤作用,并初步探討其抑瘤機(jī)制,為其臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。方法 建立昆明種小鼠S 肉瘤模型50個。隨機(jī)分為中藥高劑量組、中藥中劑量組、中藥低劑量組、荷瘤對照組、CTX化療組,通過對比觀測溫通法對小鼠體重、瘤重、肝脾重量及小鼠一般狀況的影響。結(jié)果荷瘤對照組瘤重明顯大于各治療組,與中藥低劑量組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),與其余各組比較有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),中藥高劑量組、高劑量組胸腺指數(shù)明顯高于荷瘤對照組(P<0,05),中藥高劑量組、中藥高劑量組脾指數(shù)高于荷瘤對照組(P<0.05)。結(jié)論 中藥治療各組能明顯抑制小鼠sⅢ肉瘤的生長,提高荷瘤小鼠機(jī)體免疫力,并能改善小鼠的一般狀況。
關(guān)鍵詞:溫通法;s 肉瘤;抑瘤作用;免疫調(diào)節(jié);中醫(yī)腫瘤學(xué);中醫(yī)腫瘤實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)
中醫(yī)認(rèn)為腫瘤的形成與氣滯、痰凝、血瘀等諸多因素有關(guān),但寒邪外侵、陽氣虧虛乃為其最為重要的根本原因。《靈樞·百病始生》對腫瘤之成因及其病變過程的論述最為精當(dāng):“黃帝日:積之始生,至其已成,奈何?岐伯日:積之始生,得寒乃生,厥乃成積也。”目前,多數(shù)醫(yī)家從熱毒人手,每投以寒涼消解之品,然而近年眾多醫(yī)家臨床發(fā)現(xiàn)很多惡性腫瘤患者具有畏寒乏力,舌淡苔白,脈沉遲無力等陽虛寒凝的臨床表現(xiàn),投以溫陽散寒藥,每收到較好療效。鑒此,本次實(shí)驗(yàn)確立了以溫通法治療腫瘤的原則,選用溫陽的典型代表中藥附子、干姜、桂枝,以其合劑的灌服小鼠,通過觀測對荷瘤小鼠的抑瘤作用,對免疫器官的影響及小鼠一般狀況進(jìn)行比較,探討溫通法對s 。肉瘤的`抑制作用,以期為溫通法在惡性腫瘤領(lǐng)域的進(jìn)一步應(yīng)用提供新的依據(jù)。
1 材料
1.1 動物
昆明種健康小白鼠5O只,雌雄各半,質(zhì)量18~22g,6~8周齡,由河南省實(shí)驗(yàn)動物中心提供。把它們隨機(jī)分為5組,雌雄隨機(jī),荷瘤對照組、中藥低劑量組、中藥中劑量組、中藥高劑量組、CTX化療組,每組10只。
1.2 瘤株
腹水型SⅢ小鼠瘤株,由河南省(鄭州大學(xué))醫(yī)藥科學(xué)研究所提供。
1.3 藥物及制備
1.3.1 中藥飲片
由河南省中醫(yī)院中藥藥房提供,按附子:干姜:桂枝=2:2:1的比例配制。取中藥飲片置煎煮容器中,加入相當(dāng)于生藥量5倍的冷水浸泡30min,武火煮沸后文火煮30min,過濾;藥渣加冷水繼續(xù)煎煮,武火煮沸后文火煮20min,過濾;合并兩次濾液,60%水浴濃縮,分為低、中、高3個劑量,經(jīng)計算低劑量組相當(dāng)于生藥材1.30g/ml的藥液,中劑量組相當(dāng)于生藥材2.56g/ml的藥液,高劑量相當(dāng)于生藥材3.83g/ml的藥液,冷卻后裝入滅菌藥瓶,置4~C冰箱保存?zhèn)溆谩?br />
1.3.2 注射用環(huán)磷酰胺(CTX)
江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn),規(guī)格:200mg/支。產(chǎn)品批號:07042021,F(xiàn)配現(xiàn)用。
2 方法
2.1 $18o荷瘤小鼠模型制備
將接種Sl8o第8天的腹水瘤小鼠處死,無菌條件下抽取腹水,用生理鹽水配制成約1×10。個/ml的細(xì)胞懸液,無菌條件下把5組小白鼠于每只左側(cè)腋下皮下注射0.2ml瘤細(xì)胞懸液。
2.2 給藥方法
中藥組:接種昆明鼠24h后中藥組進(jìn)行灌胃,每天1次,0.4ml/只;荷瘤對照組:生理鹽水灌胃,每天1次,0.4ml/只;CTX化療組:接種72h后生理鹽水配制成2mg/ml藥液,腹腔注射30mg/kg,隔日給藥。以上各組均用藥至接種后第1 1天。
2.3 監(jiān)測指標(biāo)
觀察小鼠接種前后的活動性、反應(yīng)靈敏度、聚堆及毛發(fā)情況。末次給藥24h后處死小鼠,小心剝離瘤塊,解剖小鼠,分別用電子天平稱取小鼠體重、瘤重、胸腺及肝、脾重量。