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2017年檢驗(yàn)技師考試重點(diǎn)
檢驗(yàn)技師考試每年只舉行一次,你知道檢驗(yàn)技師考試的重點(diǎn)是什么嗎?下面是yjbys小編為大家?guī)?lái)的檢驗(yàn)技師考試重點(diǎn)。歡迎閱讀。
銅藍(lán)蛋白
銅藍(lán)蛋白(ceruloplasmin,CER)是一種含銅的α2糖蛋白,分子量約為12萬(wàn)~16萬(wàn),不易純化。目前所知為一個(gè)單鏈多肽,每分子含6~7個(gè)銅原子,由于含銅而呈藍(lán)色,含糖約10%,末端唾液酸與多肽鏈連接,具有遺傳上的基因多形性。
CER具有氧化酶的活性,對(duì)多酚及多胺類底物有催化其氧化的能力。最近研究認(rèn)為CER可催化Fe2+氧化為Fe3+.對(duì)于CER是否是銅的載體存在不同看法。血清中銅的含量雖有95%以非擴(kuò)散狀態(tài)處于CER,而有5%呈可透析狀態(tài)由腸管吸收而運(yùn)輸?shù)礁蔚模诟沃袧B入CER載體蛋白(apoprotein)后又經(jīng)唾液酸結(jié)合,最后釋入血循環(huán)。在血循環(huán)中CER可視為銅的沒(méi)有毒性的代謝庫(kù)。細(xì)胞可以利用CER分子中的銅來(lái)合成含銅的酶蛋白,例如單胺氧化酶、抗壞血酸氧化酶等。
近年來(lái)另一研究結(jié)果認(rèn)為CER起著抗氧化劑的作用。在血循環(huán)中CER的抗氧化活力可以防止組織中脂質(zhì)過(guò)氧化物和自由基的生成,特別在炎癥時(shí)具有重要意義。
CER也屬于一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白。
臨床意義:血漿CER在感染、創(chuàng)傷和腫瘤時(shí)增加。其最特殊的作用在于協(xié)助Wilson病的診斷,即患者血漿CER含量明顯下降,而伴有血漿可透析的銅含量增加。大部分患者可有肝功能損害并伴有神經(jīng)系統(tǒng)的癥狀,如不及時(shí)治療,此病是進(jìn)行性和致命的,因此宜及時(shí)診斷,并可用銅螯合劑-青霉胺治療。血漿CER在營(yíng)養(yǎng)不良、嚴(yán)重肝病及腎病綜合征時(shí)亦往往下降。婦女妊娠期、口服避孕藥時(shí)其含量有明顯增加。
網(wǎng)織紅細(xì)胞
網(wǎng)織紅細(xì)胞是尚未完全成熟的紅細(xì)胞,在周圍血液中的數(shù)值可反映骨髓紅細(xì)胞的生成功能,因而對(duì)血液病的診斷和治療反應(yīng)的觀察均有其重要意義。網(wǎng)織紅細(xì)胞是晚幼紅細(xì)胞脫核后到完全成熟紅細(xì)胞間的過(guò)渡細(xì)胞,屬于尚未完全成熟的紅細(xì)胞,其胞質(zhì)中殘存嗜堿性物質(zhì)核糖核酸(RNA),經(jīng)活體染色后,嗜堿性物質(zhì)凝聚成藍(lán)黑色顆粒,顆粒與顆粒連綴成線,線連接成網(wǎng)。網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)是反應(yīng)骨髓造血功能的重要指標(biāo)。
青霉素瓊脂法
【原理】
某些淋球菌菌株獲得耐藥質(zhì)粒后產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶。該酶能分解青霉素,使培養(yǎng)基的pH值降低,培養(yǎng)基顏色發(fā)生改變。
【材料】
配制培養(yǎng)基(用3000ml燒瓶配制):瓊脂30g加蒸餾水2000ml,用1mol/LNaOH溶液調(diào)pH值至10.8,加入0.5%酚紅溶液20ml,充分混合后煮沸。檢查瓊脂是否充分溶解,冷卻到50℃,pH值8.5,以無(wú)菌手續(xù)加人青霉素(600mg)10支(每支先用4ml蒸餾水溶解)充分混勻后倒平皿,每65mm的平皿倒入13ml。
【方法】
1.將待測(cè)菌株培養(yǎng)過(guò)夜。
2.用接種環(huán)刮取菌苔涂于青霉素瓊脂上,約綠豆大小。
3.蓋蓋后于37℃孵箱培養(yǎng)30min,觀察結(jié)果。
【結(jié)果】
產(chǎn)酶菌株分解青霉素產(chǎn)生青霉噻唑酸使培養(yǎng)基pH值降低,顏色由紅變黃。
【臨床意義】
用于檢測(cè)淋球菌是否為產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶菌株。
乙肝病毒“二對(duì)半”
乙肝病毒存在三對(duì)抗原抗體系統(tǒng),即表面抗原(HbsAg-俗稱澳抗)和表面抗體(抗-HBs)、e抗原(HBeAg)和e抗體(抗-HBe)、核心抗原(HBcAg)和核心抗體(抗-HBc),因核心抗原主要存在于肝細(xì)胞中,血清中不能表達(dá),檢測(cè)困難,故只能檢測(cè)二對(duì)半而不能檢測(cè)三對(duì),所以稱為二對(duì)半。當(dāng)五項(xiàng)全部陰性,說(shuō)明沒(méi)有感染過(guò)乙肝,屬于健康者,如出現(xiàn)抗-HBs陽(yáng)性,或抗-HBs和抗-HBc陽(yáng)性,上述情況可能是注射過(guò)乙肝疫苗或感染乙肝后治愈而出現(xiàn)的保護(hù)性抗體。
乙肝病毒“大三陽(yáng)”(指HBsAg、HBeAg、抗-HBc陽(yáng)性)、乙肝病毒“小三陽(yáng)”(指HBsAg、抗-HBe、抗-HBc陽(yáng)性)或乙肝病毒1.5陽(yáng)(指HBsAg、抗-HBc陽(yáng)性)。這三種情況臨床多見(jiàn),并不能表示肝功能及病情的嚴(yán)重程度。“大三陽(yáng)”說(shuō)明乙肝病毒在體內(nèi)復(fù)制活躍,傳染性強(qiáng)。“小三陽(yáng)”、“1.5陽(yáng)”說(shuō)明體內(nèi)乙肝病毒復(fù)制明顯降低,傳染性弱。但如果HBV-DNA呈陽(yáng)性,則有可能存在病毒變異,仍有較強(qiáng)的傳染性。如果有上述幾種情況,肝功能正常,即屬于乙肝病毒攜帶者。
Cabot環(huán)的來(lái)源
在紅細(xì)胞內(nèi)染成紫紅色的纖細(xì)的大環(huán)形或8字形物質(zhì),常出現(xiàn)于嗜多色性、點(diǎn)彩和含H-J小體的紅細(xì)胞內(nèi),其確切來(lái)源尚不清楚,有人認(rèn)為是人工形成的變性蛋白,也有人認(rèn)為是殘留的紡錘絲或融合的微管。一般很少見(jiàn)到,偶見(jiàn)于鉛中毒或惡性貧血患者血片中,但多數(shù)人認(rèn)為無(wú)顯著臨床意義。
痰液檢查的標(biāo)本采集
留取痰標(biāo)本的方法有自然咯痰,氣管穿刺吸取、經(jīng)支氣管鏡抽取等。后二者操作復(fù)雜且有一定的痛苦,故仍發(fā)自然咯痰為主要留取方法:但痰液要求新鮮,尤其以做細(xì)胞學(xué)檢查者更為重要。留痰時(shí)患者先用清水漱口數(shù)次,然后用力咯出氣管深處痰,留于玻璃、塑料小杯內(nèi)或涂蠟的紙盒中。對(duì)于無(wú)痰或少痰患者可用經(jīng)45攝氏度加溫100g/L氯化鈉水溶液霧化吸入,促使痰液易于咯出;對(duì)小兒可輕壓腦骨柄上方,誘導(dǎo)咯痰;鑼W(xué)患者可于清理口腔后用負(fù)壓吸引法吸取痰液。痰標(biāo)本必須立即送檢,以免細(xì)胞與細(xì)菌自溶破壞。但PCr 可出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果,對(duì)其臨床應(yīng)用價(jià)值目前仍處于研究和觀察之中。測(cè)24小時(shí)痰量或觀察分層情況時(shí)應(yīng)將痰咯于無(wú)色廣口瓶中,并加石炭酸少許以防腐。
采集標(biāo)本時(shí)嚴(yán)防痰液污染容器外壁,用過(guò)的標(biāo)本需滅菌后再行處理。
基因工程抗體種類
基因工程抗體主要包括嵌合抗體、人源化抗體、完全人源抗體、單鏈抗體、雙特異性抗體等。
1.嵌合抗體
嵌合抗體是最早制備成功的基因工程抗體。它是由鼠源性抗體的V區(qū)基因與人抗體的C區(qū)基因拼接為嵌合基因,然后插入載體,轉(zhuǎn)染骨髓瘤組織表達(dá)的抗體分子。因其減少了鼠源成分,從而降低了鼠源性抗體引起的不良反應(yīng),并有助于提高療效。
2.人源性抗體
是將人抗體的CDR代之以鼠源性單克隆抗體的CDR,由此形成的抗體,鼠源性只占極少,稱為人源化抗體。
3.完全人源化抗體
采用基因敲除術(shù)將小鼠Ig基因敲除,代之以人Ig基因,然后用Ag免疫小鼠,再經(jīng)雜交瘤技術(shù)即可產(chǎn)生大量完全人源化抗體。
4.單鏈抗體
是將Ig的H鏈和L鏈的V區(qū)基因相連,轉(zhuǎn)染大腸桿菌表達(dá)的抗體分子,又稱單鏈FV。Fv穿透力強(qiáng),易于進(jìn)入局部組織發(fā)揮作用。
5.雙特異性抗體
將識(shí)別效應(yīng)細(xì)胞的抗體和識(shí)別靶細(xì)胞的抗體聯(lián)結(jié)在一起,制成雙功能性抗體,稱為雙特異性抗體。如由識(shí)別腫瘤抗原的抗體和識(shí)別細(xì)胞毒性免疫效應(yīng)細(xì)胞(CTL細(xì)胞、NK細(xì)胞、LAK細(xì)胞)表面分子的抗體(CD3抗體或CD16抗體)制成的雙特異性抗體,有利于免疫效應(yīng)細(xì)胞發(fā)揮抗腫瘤作用。
非上皮細(xì)胞成分
涂片中脫落的非上皮細(xì)胞成分又稱背景成分。包括血細(xì)胞、粘液、壞死物及異特等。
1.紅細(xì)胞涂片中可見(jiàn)到多少不等的紅細(xì)胞。因紅細(xì)胞大小較恒定,可作為測(cè)定其他細(xì)胞大小的標(biāo)尺。紅細(xì)胞量的多少與病變性質(zhì)或取材時(shí)局部損傷程度有關(guān)。
2.中性粒細(xì)胞涂片中?梢(jiàn)多量中性粒細(xì)胞。中性粒細(xì)胞易變性,胞質(zhì)溶解而成裸核。主要見(jiàn)于組織炎癥時(shí)。此外見(jiàn)于癌組織壞死后繼發(fā)感染時(shí)。
3.嗜酸性粒細(xì)胞其存在與炎癥、變態(tài)反應(yīng)或寄生蟲(chóng)感染有關(guān)。
4.淋巴細(xì)胞見(jiàn)于炎癥,特別是慢性炎癥時(shí)較多。
5.漿細(xì)胞慢性炎癥病灶中多見(jiàn)。
6.巨噬細(xì)胞涂片中一般不太多,相當(dāng)于血液中的單核細(xì)胞,有很強(qiáng)的吞噬作用。
7.組織細(xì)胞比巨噬細(xì)胞略小。核染色較深,呈圓形,位中或偏位,見(jiàn)于炎癥時(shí)。
8.多核巨細(xì)胞:細(xì)胞體積大,可含數(shù)十個(gè)胞核,若在涂片中見(jiàn)到,則要考慮結(jié)核病的可能。
9.壞死物:HE染色為紅染無(wú)結(jié)構(gòu)顆粒狀物,涂片中若出現(xiàn)壞死物質(zhì),首先應(yīng)考慮癌的可能,在癌性壞死物中或其周邊部常可見(jiàn)到殘存固縮的癌細(xì)胞核。其次考慮為結(jié)核,其壞死徹底,周邊部可發(fā)現(xiàn)多核巨細(xì)胞或上皮樣細(xì)胞。
此外涂片中還可見(jiàn)到粘液、細(xì)菌團(tuán)、真菌、植物細(xì)胞、染料沉渣和棉花纖維等。
細(xì)胞因子測(cè)定方法
(1)生物學(xué)檢測(cè)法:又稱生物活性檢測(cè),是根據(jù)細(xì)胞因子特定的生物活性而設(shè)計(jì)的檢測(cè)法。生物活性檢測(cè)法又可分為:①細(xì)胞增殖法;②靶細(xì)胞殺傷法;③細(xì)胞因子誘導(dǎo)的產(chǎn)物分析法;④細(xì)胞病變抑制法。
(2)免疫學(xué)檢測(cè)法:細(xì)胞因子均為蛋白或多肽,具有較強(qiáng)的抗原性。可利用抗原抗體特異性反應(yīng)的特性,用免疫學(xué)技術(shù)定量檢測(cè)細(xì)胞因子。常用的方法包括ELISA、RIA及免疫印跡法。
(3)分子生物學(xué)方法:目前公認(rèn)的細(xì)胞因子的基因均已克隆化,較容易地得到某一細(xì)胞因子cDNA探針或根據(jù)已知的核苷酸序列人工合成寡聚核苷酸探針。常使用斑點(diǎn)雜交、Northernblot、逆轉(zhuǎn)錄PCR,細(xì)胞或組織原位雜交等。具有靈敏、快速等優(yōu)點(diǎn),甚至從1~10個(gè)細(xì)胞中就可檢出其中的特異mRNA。
(4)臨床應(yīng)用:細(xì)胞因子測(cè)定可作為特定疾病診斷的輔助指標(biāo),用來(lái)評(píng)估機(jī)體的免疫狀態(tài)、判斷治療及預(yù)后,用于臨床治療應(yīng)用時(shí)的監(jiān)測(cè)等。
尿中白細(xì)胞
尿中白細(xì)胞除在腎移植術(shù)后發(fā)生排異后應(yīng)及淋巴性白血病時(shí)可見(jiàn)到淋巴細(xì)胞外,一般主要地是拽中性分葉核粒細(xì)胞而言,尿中的白細(xì)胞來(lái)自血液,健康成人尿中排出白細(xì)胞和上皮細(xì)胞不超過(guò)200萬(wàn)/24小時(shí),因此在正常尿中可偶然見(jiàn)到1-2個(gè)白細(xì)胞/HPF,如果每個(gè)高倍視野見(jiàn)到5個(gè)白細(xì)胞為增多,白細(xì)胞體積比紅細(xì)胞大,呈圓球形,在中性、弱酸性或堿性尿中均見(jiàn)不到細(xì)胞核,通過(guò)染色可清楚地看到核結(jié)構(gòu)。
炎癥時(shí)白細(xì)胞發(fā)生變異或已殘廢其外形變得不規(guī)則,結(jié)構(gòu)不清,稱為膿細(xì)胞。尿標(biāo)本久置室溫后,因PH滲透壓等改變,白細(xì)胞也可產(chǎn)生退行性變,難發(fā)與膿細(xì)胞區(qū)別,故有人認(rèn)為區(qū)別尿中白細(xì)胞與膿細(xì)胞并無(wú)實(shí)際意義,而其數(shù)量多少由更為重要。
急性腎盂炎時(shí),在低滲條件下有時(shí)可見(jiàn)到中性粒細(xì)胞內(nèi)顆粒呈布朗分子運(yùn)動(dòng)。由于光折射,在油鏡下可見(jiàn)灰藍(lán)爭(zhēng)發(fā)光現(xiàn)象,因其運(yùn)動(dòng)似星狀閃光,故稱為閃光細(xì)胞(glitter cell)。
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