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臨床醫學檢驗技士備考資料:免疫電泳
免疫電泳技術是電泳分析與沉淀反應的結合產物。這種技術有兩大優點,一是加快了沉淀反應的速度,二是將某些蛋白組分利用其帶電荷的不同而將其分開,再分別與抗體反應,以此作更細微的分析。免疫電泳技術的種類很多,這里僅將常用的技術介紹如下。
免疫電泳
免疫電泳為區帶電泳與免疫雙向擴散的結合,是由Grabar和Williams(1953)首先報道的。方法是先利用區帶電泳技術將不同電荷和分子量的蛋白抗原在瓊脂內分離開,然后與電泳方向平行在兩側開槽,加入抗血清。置室溫或37℃使兩者擴散,各區帶蛋白在相應位置與抗體反應形成弧形沉淀線(圖12-8)。根據各蛋白所處的電泳位置,可分為白蛋白區、球蛋白α1區、α2區、β區和γ區。各區帶常見血漿蛋白見表12-3和圖12-9
PreALB:前白蛋白;HP:觸珠蛋白;α1脂蛋白;ALB:白蛋白;TRF:轉鐵蛋白
βLIP:β脂蛋白;AAT:抗胰蛋白酶;AAG:酸糖蛋白;α2M:α2巨球蛋白
免疫電泳沉淀線的數目和分辨率受許多因素影響。首先是抗原與抗體的比例,同其它沉淀反應一樣,要預測抗體與抗原的最適比;其次是抗血清的抗體譜,一只動物的抗血清往往缺乏某些抗體,如將幾只動物或幾種動物的抗血清混合使用,則效果更好;電泳條件,如緩沖液、瓊脂和電泳等皆可直接影響沉淀線的分辨率。對于免疫電泳的分析,更重要的是經驗的積累,只有多看,多對比分析,才能作出恰當的結論。
免疫電泳目前大量應用于純化抗原和抗體成分的分析及正常和異常體液蛋白的識別等方面。
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