毛鉤藤葉對中樞抑制作用的初步研究
鉤藤是中醫(yī)臨床治療肝風(fēng)內(nèi)動，驚癇抽搐的常用中藥，下面是小編搜集的一篇關(guān)于毛鉤藤葉對中樞抑制作用探究的論文范文，歡迎前來閱讀借鑒。
【摘要】 目的研究毛鉤藤葉對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的藥理作用。方法采用小動物自主活動測定儀測定小鼠的自主活動。采用戊巴比妥鈉閾下催眠實驗及戊巴比妥鈉閾劑量誘導(dǎo)小鼠睡眠時間實驗，觀察毛鉤藤葉的鎮(zhèn)靜催眠作用。結(jié)果鉤藤組(12 g/kg)與毛鉤藤葉低(6 g/kg)、中(9 g/kg)、高(12 g/kg)3個劑量組均能使小鼠自發(fā)活動減少，使戊巴比妥鈉閾下睡眠劑量致小鼠入睡個數(shù)增多，并延長戊巴比妥鈉閾劑量睡眠時間，且以毛鉤藤葉高劑量組效果最為明顯。結(jié)論毛鉤藤葉具有顯著的中樞抑制作用。
【關(guān)鍵詞】 鉤藤; 毛鉤藤葉; 自主活動; 催眠作用
鉤藤具有清熱平肝、息風(fēng)定驚之功效，是中醫(yī)臨床治療肝風(fēng)內(nèi)動，驚癇抽搐的常用中藥。2005年版《中國藥典》規(guī)定中藥鉤藤為茜草科植物鉤藤Uncaria rhyuchophylla ( Miq. ) Jacks.，華鉤藤U. siueusis (Oliv. ) Havil.，大葉鉤藤U . macrophylla Wall.，毛鉤藤U. hirsute Havil.，無柄果鉤藤U. sessillfructus Roxb.的干燥帶鉤莖枝[1]。鉤藤中含有多種吲哚類生物堿,主要有鉤藤堿,異鉤藤堿[2～4]。最近的研究發(fā)現(xiàn)鉤藤葉中也含有鉤藤堿和異鉤藤堿[5～6]。目前對鉤藤的研究多集中于該植物帶鉤的莖枝，而對于該植物的其他部位研究報道較少。為開發(fā)和利用鉤藤葉資源，本文對毛鉤藤葉的中樞神經(jīng)系統(tǒng)作用進行初步的藥理學(xué)研究。
1 材料與儀器
1.1 藥材 毛鉤藤嫩枝采自本校中藥圃，經(jīng)本校中藥鑒定教研室張宏偉副教授鑒定為茜草科植物毛鉤藤Uncaria hirsute Havil.。將毛鉤藤葉與帶鉤莖枝分別剪下，在60℃以下烘干，將兩種藥材分別用75%乙醇回流提取兩次，回收乙醇后，減壓濃縮制成1∶1(1g/ml)醇提取液。放入4℃冰箱中保存?zhèn)溆�，使用前用蒸餾水配置成所需濃度。
戊巴比妥鈉由中國醫(yī)藥集團上�；瘜W(xué)試劑公司生產(chǎn)，批號F20050405。95%乙醇、無水乙醇等試劑由廣東汕頭西隴化工廠生產(chǎn)。
1.2 動物 SPF級昆明種小鼠, 雌雄各半, 體重20～25 g, 由南方醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供，動物合格證號: SCXK粵2006-0015。
1.3 儀器 YLS-1A多功能小動物自主活動記錄儀，山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備站提供。
2 方法
2.1 小鼠自發(fā)活動實驗[7] 昆明種小鼠50只，雌雄各半，禁食12 h，飲水不限。將小鼠隨機分為5組，即空白對照組(等容量生理鹽水組)，鉤藤(即毛鉤藤帶鉤莖枝，下同)組(12 g/kg)和毛鉤藤葉低(6 g/kg)、中(9 g/kg)、高(12 g/kg)3劑量組。每組10只動物。將各組小鼠放入YLS-1A多功能小動物自主活動記錄儀中, 適應(yīng)5 min后，測定小鼠給藥前的自主活動次數(shù), 記錄時間為5 min。記錄時室內(nèi)保持安靜。然后按劑量給各組小鼠灌胃給藥(ig)。分別于給藥后30，60 min各測定1次自發(fā)活動數(shù)，記錄5min內(nèi)各組小鼠的活動數(shù)。
2.2 戊巴比妥鈉閾下睡眠劑量誘導(dǎo)小鼠入睡實驗[8] 取昆明種小鼠50只，雌雄各半。將小鼠隨機分為5組，即空白對照組(等容量生理鹽水組)，鉤藤組(12 g/kg)和毛鉤藤葉低(6 g/kg)、中(9 g/kg)、高(12 g/kg)3劑量組。按各組劑量給小鼠ig給藥， 藥后60 min后給每只小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉30 mg/kg，以小鼠翻正反射消失1 min以上為入睡標準，記錄15 min內(nèi)各組小鼠的入睡個數(shù)。
2.3 戊巴比妥鈉閾劑量誘導(dǎo)小鼠睡眠時間實驗[8] 取昆明種小鼠50只，雌雄各半，隨機分為5組。將小鼠隨機分為5組，即空白對照組(等容量生理鹽水組)，鉤藤組(12 g/kg)和毛鉤藤葉低(6 g/kg)、中(9 g/kg)、高(12 g/kg)3劑量組。按各組劑量給小鼠ig給藥，藥后60 min后給每只小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉50 mg/kg，然后記錄各組小鼠的睡眠時間(以給藥后小鼠翻正反射消失為入睡時間，翻正反射消失至恢復(fù)為睡眠時間)。
2.4 統(tǒng)計學(xué)處理 實驗數(shù)據(jù)以±s表示，應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進行完全隨機設(shè)計資料的單因素方差分析或兩獨立樣本t檢驗，組間多重比較方差齊時用LSD方法，不齊時用Games- Howell方法。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。計數(shù)資料采用χ2檢驗。
3 結(jié)果
3.1 藥物對小鼠自發(fā)活動的`影響由表1可見，空白對照組給藥前后小鼠自發(fā)活動次數(shù)未見明顯變化(P>0.05)。鉤藤組和毛鉤藤葉低、中、高3個劑量組給藥后小鼠的自發(fā)活動明顯減少，與給藥前相比，均有顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。鉤藤組和毛鉤藤葉中、高劑量組給藥后小鼠的自發(fā)活動次數(shù)與空白對照組相比，均有非常顯著差異(P<0.01)。毛鉤藤葉對小鼠自發(fā)活動的抑制隨劑量加大而加強，毛鉤藤葉高劑量組與鉤藤組比較差異非常顯著(P<0.01)。表1 各組小鼠自發(fā)活動次數(shù)與空白組比較，*P<0.01;與給藥前比較，△P<0.05，△△P<0.01;與鉤藤組比較，▲P<0.01;n=10
3.2 藥物對戊巴比妥鈉閾下睡眠劑量致小鼠入睡的影響 結(jié)果表明，空白組腹腔注射戊巴比妥鈉30 mg/kg后小鼠無一睡眠。鉤藤組和毛鉤藤葉低、中、高3個劑量組均有小鼠入睡，各組小鼠入睡個數(shù)經(jīng)χ2檢驗表明，χ2=16.586，ν=4，P=0.002(雙側(cè))，差異有顯著性意義，可認為5個實驗組之間的差異有顯著性意義，其中毛鉤藤葉高劑量組小鼠的入睡個數(shù)最多。見表2～3。表2 戊巴比妥鈉閾下劑量誘導(dǎo)睡眠的結(jié)果表3 戊巴比妥鈉閾下劑量誘導(dǎo)睡眠的統(tǒng)計結(jié)果
3.3 毛鉤藤葉對戊巴比妥鈉睡眠時間的影響 由表4可見，鉤藤及毛鉤藤葉給藥后可使戊巴比妥鈉閾劑量所致小鼠睡眠時間延長，鉤藤組及毛鉤藤葉低劑量組可使睡眠時間延長，但與空白組比較無顯著性差異(P>0.05)。毛鉤藤葉中、高劑量組與空白組比較均有顯著差異(P<0.05或P<0.01)。毛鉤藤葉3個劑量組的小鼠睡眠時間隨劑量加大而延長。毛鉤藤葉高劑量組與鉤藤組比較差異非常顯著(P<0.01)。表4 藥物對戊巴比妥鈉閾劑量睡眠時間的影響
4 討論
本研究主要考察毛鉤藤葉對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的抑制作用。采用了小鼠自發(fā)活動實驗、戊巴比妥鈉閾下睡眠劑量誘導(dǎo)小鼠入睡實驗及戊巴比妥鈉閾劑量誘導(dǎo)小鼠睡眠時間實驗來評價毛鉤藤葉的鎮(zhèn)靜催眠作用，并與毛鉤藤帶鉤莖枝進行對比。從實驗結(jié)果可知，毛鉤藤葉低、中、高3個劑量組給藥后小鼠的自發(fā)活動明顯減少，鉤藤組和毛鉤藤葉中、高劑量組與空白組相比，差異非常顯著。毛鉤藤葉對小鼠自發(fā)活動的抑制隨劑量加大而加強，毛鉤藤葉高劑量組與鉤藤組比較有差異，表明毛鉤藤葉的鎮(zhèn)靜作用比鉤藤莖枝明顯。毛鉤藤葉高劑量組還能明顯增加戊巴比妥鈉閾下睡眠劑量誘導(dǎo)入睡的小鼠個數(shù)，并能明顯延長戊巴比妥鈉閾劑量的小鼠睡眠時間，與鉤藤組相比較有差異。提示高劑量的毛鉤藤葉對中樞的抑制作用較為顯著。
實驗結(jié)果表明毛鉤藤葉具有明顯的鎮(zhèn)靜催眠作用，其作用強度與劑量有一定關(guān)系。但毛鉤藤葉抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)的物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機理仍有待深入研究。
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