組培實(shí)習(xí)心得
組培實(shí)習(xí)給了我們一次接近大自然的機(jī)會讓我感受到自然之偉大。下面小編為大家?guī)斫M培實(shí)習(xí)心得的內(nèi)容，希望大家喜歡。
篇一：組培實(shí)習(xí)心得
一、前言
(1)植物組織培養(yǎng)是指在無菌和人工控制的環(huán)境條件下，利用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，對離體的植物器官、組織、細(xì)胞及原生質(zhì)體進(jìn)行培養(yǎng)，使其再生細(xì)胞或完整植株的技術(shù)。該技術(shù)能應(yīng)用于植物離體快繁、無病毒苗木培育、培育新品種或創(chuàng)制新物種、次生代謝產(chǎn)物生產(chǎn)、植物種質(zhì)資源的離體保存、人工種子等。而組織培養(yǎng)的實(shí)習(xí)能夠?qū)⒄n本中所學(xué)的理論知識應(yīng)用于實(shí)踐，開拓我們的視野，擴(kuò)大我們的知識面，對于提高我們的探究意識和創(chuàng)新、動手操作能力具有很重要的意義。
(2)植物細(xì)胞全能性是植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)，是指每一個(gè)植物細(xì)胞帶有該植物的全部遺傳信息，在適當(dāng)?shù)臈l件下可表達(dá)出該細(xì)胞的所有遺傳信息，分化出植物有機(jī)體所有不同類型的細(xì)胞，形成不同類型的器官甚至胚狀體，直至形成完整再生植株。
(3)茅膏菜具有較大的藥用價(jià)值和研究價(jià)值但種子萌發(fā)率低，因此可利用種子繁殖獲得無菌苗后在進(jìn)行快繁。
二、實(shí)習(xí)項(xiàng)目
茅膏菜的組織培養(yǎng)
三、實(shí)習(xí)目的
(1)復(fù)習(xí)、鞏固和植物組織培養(yǎng)的基本理論和基本知識，同時(shí)進(jìn)一步豐富所學(xué)知識;
(2)了解茅膏菜的形態(tài)、習(xí)性、種類、用途的多樣性以及它們與環(huán)境的關(guān)系，激發(fā)學(xué)習(xí)的積極性;
(3)理論聯(lián)系實(shí)際，通過自主學(xué)習(xí)和研究性學(xué)習(xí)培養(yǎng)獨(dú)立工作能力和創(chuàng)新意識;
(4)重點(diǎn)掌握茅膏菜組織培養(yǎng)的基本操作技術(shù)及方法;
四、實(shí)習(xí)時(shí)間安排：
(1)2012-11-18、2012-11-24、2012-11-25在圖書館查閱茅膏菜及組織培養(yǎng)的相關(guān)資料;
(2)2012-12-1至2012-12-2去奇正藏藥廠藥材種植基地參觀，采集茅膏菜種子;
(3)2012-12-8至2012-12-13在植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行茅膏菜的快速繁殖實(shí)驗(yàn);
(4)2012-12-14至2012-12-16撰寫實(shí)習(xí)報(bào)告;
五、實(shí)習(xí)地點(diǎn)
(1)西藏農(nóng)牧學(xué)院圖書館、電子閱覽室
(2)奇正藏藥廠藥材種植基地(奇正藏藥廠藥材種植基地位于西藏林芝地區(qū)，全地區(qū)海拔500至7800多米，特殊的地形和氣候，使這里各種物種資源十分豐富，而且沒有受過污染。該種植基地目前已成功種植西藏高山紅牡丹、茅膏菜、波棱瓜、翼首草、獨(dú)一味、藏麻黃等多種藥用植物)
(3)西藏農(nóng)牧學(xué)院植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室(植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室具有進(jìn)行該項(xiàng)技術(shù)的完整設(shè)備和條件 ，便于進(jìn)行茅膏菜的組織培養(yǎng))
六、實(shí)習(xí)材料及工具：自封袋 、采集箱 、三角紙袋 、高壓滅菌鍋、超凈工作臺、燒杯、鑷子、剪刀、培養(yǎng)皿、三角瓶、酒精燈 、醫(yī)用
脫脂棉、培養(yǎng)架、醫(yī)用小推車、蛭石、河沙、園土、泥炭土、育苗盤、噴霧器、配制MS培養(yǎng)基所需母液、75%酒精、70%酒精、0.1%升汞、NAA、6-BA、甲醛、高錳酸鉀、0.1%多菌靈、活性炭、茅膏菜種子
七、實(shí)習(xí)內(nèi)容
(1)查閱資料
借助圖書館，電子閱覽室查閱關(guān)于茅膏菜的生長習(xí)性，和其組織培養(yǎng)相關(guān)知識為實(shí)習(xí)提供技術(shù)支撐。
茅膏菜：【別名】石龍芽草、山胡椒、胡椒草、夏無蹤、白花葉、黃金絲、滴水不干、山地皮、捕蟲草、食蟲草、柔魚草、蒼蠅草、捕蠅草、蒼蠅網(wǎng)、珍珠草、露珠草、無風(fēng)自動草。為茅膏菜科植物茅膏菜或光萼茅膏菜的全草。多年生草本，直立或有時(shí)呈攀援狀，高9-32cm，有紫紅色汁液。鱗莖狀球莖紫色，直徑約6mm。基生葉密集成近一輪或最上幾片著生于節(jié)間伸長的莖上;退化基生葉線狀鉆形，長約2mm;不退化基生葉圓形或扁圓形，花時(shí)枯凋;莖生葉互生，盾狀，半月形或半圓形，長2-3mm，邊緣或葉上面有多數(shù)頭狀腺毛，分泌粘液，形成露珠狀。茅膏菜屬植物葉面密被分泌黏液的腺毛，當(dāng)昆蟲停落在葉面時(shí)，即被黏液粘住，而腺毛又極敏感，有物觸及，便會向內(nèi)和向下運(yùn)動，將昆蟲緊壓于葉面。當(dāng)昆蟲逐漸被腺毛分泌的蛋白質(zhì)分解酶所消化后，腺毛重新張開再次分泌黏液，故能常在葉片上見到昆蟲的軀殼。這類植物本身有葉綠素，可以進(jìn)行光合作用，但根系極不發(fā)達(dá)，因此靠捕食昆蟲就能彌補(bǔ)其氮素養(yǎng)分的不足。
該植物全草含磯松素、茅膏醌、羥萘醌、氫化萘醌等多種醌類成分。腺毛分泌物含類似胰酶的蛋白酶�？捎糜谥委煰彾�、瘰病。治胃痛，赤白痢，小兒疳積，跌打損傷。
生態(tài)環(huán)境：1.生于海拔1200-3650m的山坡潮濕地的松林下、草叢中或溪溝邊。⒉生于山坡、溪邊草叢、灌叢和疏林下。 分布：⒈分布于四川、貴州、云南和西藏。⒉分布于江蘇、安徽、浙江、江西、福建、臺灣、湖北、湖南、廣東、海南、廣西等地。
茅膏菜萌發(fā)培養(yǎng)基為：1/2MS培養(yǎng)基(pH=5.8)，增殖培養(yǎng)基為1/2MS+6-BA0.1+NAA0.1，生根培養(yǎng)基為1/2MS+活性炭0.5g/L+NAA0.2
(2)采集茅膏菜種子
采集地點(diǎn)：奇正藏藥廠藥材種植基地
采集時(shí)間：2012-12-1上午
(3)培養(yǎng)基的配制
按照MS培養(yǎng)基的擴(kuò)大倍數(shù)配制所需培養(yǎng)基，待完全溶解后導(dǎo)入三角瓶中，用封口膜封好，放入高壓滅菌鍋中121℃，滅菌20min后取出培養(yǎng)基冷卻至凝固。
(4)茅膏菜無菌苗的獲得
先打開超凈工作臺上的紫外燈，用紫外線滅菌30min，然后將其關(guān)閉。
第一步：用濾紙將茅膏菜的種子包好，并用繩子進(jìn)行捆扎。 第二步：先打開超凈工作臺上的紫外燈，用紫外線滅菌30min，
然后將其關(guān)閉。 第三步：用自來水清洗雙手后，在超凈工作臺上點(diǎn)燃酒精燈后將雙手及小臂用75%酒精擦拭。將捆扎好的種子用70%酒精消毒30s，然后用無菌水沖洗2-3次。
第四步：用0.1%的升汞將種子消毒12min，然后用無菌水沖洗5-6次。 第五步：用鑷子將繩子解開，將種子放入墊有濾紙的培養(yǎng)皿中吸取種子表面的液體。然后將種子點(diǎn)接在1/2MS培養(yǎng)基(pH=5.8)表面。 第六步：將接種好的種子封好，放置在培養(yǎng)架上光照3000-4000LX，室溫培養(yǎng),30d。
(2)茅膏菜的增殖培養(yǎng)
將茅膏菜萌發(fā)出的無菌苗在超凈工作臺上剪去根，接種到增殖培養(yǎng)基1/2MS+6-BA0.1+NAA0.1，放置培養(yǎng)架上室溫，光照3000-4000LX培養(yǎng)40d。
(5)茅膏菜的生根培養(yǎng)
增殖40d后，把茅膏菜適當(dāng)高度的芽(3-4cm)在超凈工作臺上接種到1/2MS+活性炭0.5g/L+NAA0.2,進(jìn)行生根培養(yǎng)，并觀察記錄生根率。結(jié)果：生根率為85%。
(6)生根苗的馴化
將培養(yǎng)瓶放在溫室自然光照下培養(yǎng)，同時(shí)晝夜有明顯溫差，5-7d后再打開封口膜使瓶中溫度降低，通氣加強(qiáng)，2-3d后可移苗。
(7)生根苗的移栽
第一步：移栽基質(zhì)的準(zhǔn)備。將河沙：園土：泥炭土：(1:1：2)
和蛭石攪拌均勻。用甲醛和高錳酸鉀進(jìn)行熏蒸消毒并密封，3d后打開取出基質(zhì)在陽光下暴曬，再裝入育苗盤中。
第二步：幼苗出瓶后，先洗去粘附的培養(yǎng)基，用0.1%多菌靈溶液浸泡后移栽于基質(zhì)中，種植密度為2-3cm×4-6cm。移栽完后一次性澆透水，并用0.1%多菌靈噴霧。當(dāng)葉表面水珠消失后蓋好保溫薄膜，保持溫度15-25℃，濕度在85%以上，同時(shí)注意通風(fēng)，控制光照50%左右，每7-10d噴一次殺菌劑。
第三步：待小苗成活并長新，稍后可施稀薄的MS培養(yǎng)液作追肥，逐漸增強(qiáng)通風(fēng)直至約2周后打開保濕薄膜即可，并統(tǒng)計(jì)移栽成活率。結(jié)果：移栽成活率為30%。
由此看出，茅膏菜移栽成活率較低，其原因分析有以下幾點(diǎn)：(1)當(dāng)前溫度較低不利于茅膏菜的'移栽(2)幼苗水分供需不平衡(3)試管苗老化(4)移栽過程中微生物感染(4)試管苗的健壯性差(5)過渡培養(yǎng)的環(huán)境條件不利于試管苗的生長
八、實(shí)習(xí)心得
(1)通過本次實(shí)習(xí)讓我了解了更多關(guān)于茅膏菜的知識，基本掌握了進(jìn)行茅膏菜組織培養(yǎng)的內(nèi)容、步驟以及應(yīng)該注意的問題，開拓了我的視野，在一定程度上提高了我的動手實(shí)踐能力和操作技能。同時(shí)也讓我對課本專業(yè)知識理解的更加深刻。
(2)實(shí)習(xí)中我也掌握了超凈工作臺、高壓滅菌鍋等儀器的使用及注意事項(xiàng)，同時(shí)也掌握了配制培養(yǎng)基的方法。
(3)通過去奇正藏藥廠藥材種植基地采集種子和管理員的介紹我學(xué)
到了關(guān)于獨(dú)一味、翼首草、藏麻黃等藏藥材知識，豐富了我的知識面，增進(jìn)了我對藏藥材的理解，提高了我對本專業(yè)的學(xué)習(xí)興趣和探究意識。
(4)這次實(shí)習(xí)也增進(jìn)了我們班級同學(xué)之間的了解，加強(qiáng)了我們同學(xué)和老師之間的友誼，增強(qiáng)了班級的團(tuán)結(jié)力和凝聚力 。
(5)本次實(shí)習(xí)給了我們一次接近大自然的機(jī)會讓我感受到自然之偉大，她留給我們?nèi)绱硕嗟膶氋F財(cái)富，等待我們?nèi)グl(fā)掘，去保護(hù)，去利用，我們再開發(fā)其研究價(jià)值的同時(shí)更應(yīng)該懂得怎樣以小代價(jià)換取大創(chuàng)造。
篇二：組培實(shí)習(xí)心得
本次實(shí)習(xí)，我接觸到向往已久的組織培養(yǎng)技術(shù)，原本認(rèn)為很高大上的技術(shù)，在老師的細(xì)心指導(dǎo)下也逐漸掌握要領(lǐng)。這次，我們進(jìn)行了麻竹初代繁殖體系的建立和容器苗的移植兩項(xiàng)重要的工作。實(shí)驗(yàn)的過程很繁瑣，每一步都至關(guān)重要，每一步都需要我們付出十二分的細(xì)心和耐心才能獲得最后的成功。
在配置培養(yǎng)基時(shí)，需要加入的母液種類繁多，我們的細(xì)心遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠，每加入一種母液就核對一種母液的細(xì)心制度讓我們深深折服。另外，培養(yǎng)基的滅菌至關(guān)重要，這決定了之后工作的絕對成敗。通過，配置培養(yǎng)基這一基本但是至關(guān)重要的工作，我們學(xué)會了付出細(xì)心，用耐心收獲成果。
另外，理論與實(shí)踐是不可分割的，在理論學(xué)習(xí)的同時(shí)，我們還需要認(rèn)真的進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。在現(xiàn)代農(nóng)業(yè)中，組織培養(yǎng)有著極其重要的作用，因此更需要我們在實(shí)驗(yàn)中認(rèn)真的學(xué)習(xí)組培的技術(shù)。 根據(jù)細(xì)胞的全能性原理以及組培原理將離體的植物器官原生質(zhì)體培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基中，給與適當(dāng)?shù)臈l件，使其長成人類所需要的組織、器官和完整的植株的過程。而自然下的植株是含有病毒的，這樣會導(dǎo)致經(jīng)濟(jì)作物大量減產(chǎn)，為了克服這一困難在組織培養(yǎng)前對外植體進(jìn)行脫毒，這不僅克服了經(jīng)濟(jì)作物的減產(chǎn)還提高了產(chǎn)量，大大提高了經(jīng)濟(jì)效益。并切植物組織培養(yǎng)實(shí)現(xiàn)了高價(jià)植物種類的工廠化生產(chǎn)，為這些緊缺植物和植物體內(nèi)各物質(zhì)特別是次生代謝物的提取提供了更多的材料。
在本次實(shí)驗(yàn)中，我發(fā)現(xiàn)自身在做實(shí)驗(yàn)時(shí)還存在很多的不足，在理論知識方面也有很多的欠缺。這就要求我在以后的學(xué)習(xí)中，更加努力認(rèn)真。同時(shí)也感謝團(tuán)隊(duì)同學(xué)的包容與互助以及老師的指導(dǎo)和教導(dǎo)。
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