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論文題目:2010級不同地區ABO血型分布的研究
課題研究意義及目的:
研究的意義:
測定ABO血型的意義有如下點:
(1)用于醫療輸血,血型不符合的輸血會造成輸血反應。各種原因失血治療和搶救。
(2)手術前為防止手術中出血過多需提前備血,此時也需要檢查血型和進行配血。
(3)新生兒溶血,當母親與胎兒血型不合時引起血型抗原免疫所致的一種溶血性疾病。最為常見的是ABO血型系統所造成的ABO溶血。母親為O型血,最易發生癥或流產。
(4)用于器官移植術,供器官者與受器官者血型不合可導致和加速對移植器官的排斥。
(5)法律上可用于親子鑒定的參考,法醫學上可通過血跡或其他含有血型疑犯的身份;
(6)為保證臨床用血的需求,探索臨床用血的血型分布規律,制定適宜的采血計劃,合理調節庫存狀況,合理利用血液資源。
研究的目的
1.ABO血型的鑒定方法;
2.ABO血型的分型依據;
3.了解抗原抗體反應與ABO血型之間的關系;
4.了解不同地區(省份)的血型分布有什么不同
參考文獻:
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課題研究內容和方法:
研究對象:
中國不同省份ABO血型背景:
O型血在人類學上是一種非常古老的血型,也叫做狩獵血型;A型血是第二種最多見的血型,其祖先是最先從事農耕作物的,也叫做農耕血型;與O型和A型相比,B型卻是人類學上較晚出現的血型,這類人是最早習慣于氣候和其他變遷的游牧民族,也叫做游牧血型。AB型為最晚出現、最稀少的血型,占總人口不到5%。這類人擁有部分A型血和部分B型血的特征。在中國北方長城的兩邊,匈奴、突厥、鮮卑、女真、契丹、西夏等等古老游牧民族,肉食為主,B型血占了大多數。現在蒙古、滿族中B型血占40~60%;湖北湖南人、廣東人、福建人、江浙人等等苗瑤壯侗語族各民族,素食為主,A型血數量呈上升趨勢,估計30~60%;在長江流邊,AB型血是比較常見的,但數量非常少,歷史上是B型血人南下跟A型血人繁雜而成的。在中原地區,陜西人、山東人、山西河北南部、河南北部等,O型血占主要地位。
研究方法:
1.原理:常用鹽水凝集法檢測紅細胞上存在的血型抗原,以及血清中存在的血型抗體,依據抗原抗體存在的情況判定血型。常規的方法有:①正向定型:用已知抗體的標準血清檢查紅細胞上未知的抗原。②反向定型:用已知血型的標準紅細胞檢查血清中未知的抗體。結果判定:凡紅細胞出現凝集者為陽性,呈散在游離狀態為陰性。ABO血型定型原則見表1-5-2。
2材料
標準血清(抗A或抗B或抗A+B)被檢者血清5%被檢者紅細胞5%標準紅細胞鹽水懸液生理鹽水試管膠頭滴管離心機
3.實驗步驟
(1)標準血清的制備
a.從正常人血液中分離血清采血—孵育—冷藏—分離血清—滅活補體—效價滴定—親和力實驗—特異性實驗—抗血清的防腐和染色—分裝保存
b.人ABO血型單克隆抗體應用淋巴細胞雜交瘤技術,即可得到ABO血型特異性單克隆血清
(2)5%被測紅細胞鹽水懸液的制備
在1ml生理鹽水中滴入兩滴全血
(3)5%標準紅細胞鹽水懸液的制備
分別用A,B,O型健康人血液洗滌配制成5%A,B,O型紅細胞懸液
(4)被測者血清的分離
抽取被測者血清待凝后分離血清
(5)a.正定型
在標記的四支試管中加入抗A和抗B的血清,在加待測者紅細胞懸液后混勻,離心15分鐘(1000rpm),觀察是否發生凝集現象
b.反定型在標記的四支試管中加入被測者的血清,在加標準紅細胞懸液后混勻,離心15分鐘(1000rpm),觀察是否發生凝集現象預期結果:
注意事項:
1.所用器材必須干燥清潔、防止溶血,凝集和溶血的意義一樣。為避免交叉污染,建議使用一次性器材。標準血清從冰箱取出后,應待其平衡至室溫再用,用畢后應盡快放回冰箱保存。
2、加試劑順序:一般先加血清,然后再加紅細胞懸液,以便核實是否漏加血清
3、雖然IgM抗A和抗B與相應紅細胞的反應溫度以4℃最強,收集整理但為了防止冷凝集現象干擾,一般在室溫20℃~24℃內進行試驗,而37℃條件,可使反應減弱。
4、幼兒紅細胞抗原未發育完全、老年體弱者抗原性較弱,最好采用試管法鑒定血型。
5、正、反定型結果一致才可發報告。
6、反定型法:先天性免疫球蛋白缺陷,長期大量應用免疫抑制,血型抗體可減弱或消失;血清中存在自身免疫性抗體、冷凝集素效價增高、多發性骨髓瘤、免疫球蛋白異常均可造成反定型困難;新生兒體內可存在母親輸送的血型抗體,且自身血型抗體效價又低,因而出生6個月以內的嬰兒不宜做反定型。老年人血清中抗體水平大幅度下降或被檢者血清中缺乏抗A及(或)抗B抗體,可引起假陰性或血型鑒定錯誤。
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